提出了以醋酸-水作为流动相的体系中,在ODS柱上分离生物大分子的反相高效液相色谱(RPLC)方法.实验结果表明,醋酸-水的洗脱能力强于甲醇-水-三氟醋酸体系,在一定程度上克服了色谱分离中一些蛋白质的不可逆吸附且具有便于冷冻干燥的优点.用参数Z(1mol溶剂化溶质被溶剂化固定相吸附时从两者接触表面释放出置换剂的摩尔总数,logI(与1mol溶质对固定相亲和势有关的常数)和j(与1mol溶剂对固定相亲和势有关的常数)对9种蛋白质在此流动相体系中的保留进行了表征.该流动相使在RPLC中用于分离生物大分子的三元流动相体系成为二元流动相体系,更适合于理论研究.同时得出结论:在醋酸-水体系中,蛋白质与固定相之间的作用力主要为非选择性作用力;蛋白质在醋酸-水和甲醇-水-三氟醋酸两种流动相体系中的分子构象变化不同.
参考文献
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