利用色氨酸具有自然荧光的特点,建立了测定血清中色氨酸浓度的高效液相色谱-荧光检测分析方法。血清标本经高氯酸沉淀蛋白后取上清液进行色谱分析,色谱柱为Nova-Pak C18柱,流动相为5 mmol/L磷酸二氢钾水溶液,流速为1 mL/min,激发波长为254 nm,荧光检测波长为338 nm。该法检测色氨酸浓度的线性范围为0.49 μmol/L～490.00 μmol/L,最低检测限为0.10 μmol/L,回收率为97.2%～98.6%(平均值为97.9%),批内、批间相对标准偏差均小于5%,苯丙氨酸、酪氨酸、5-羟色胺和5-羟吲哚乙酸等物质对该法均无干扰。进样后5 min内可完成检测,整个实验过程耗时小于30 min。方法简便、快速、准确、可靠,适用于临床和科研工作。
参考文献
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