去锌牛胰岛素的制备和鉴定

色谱 , 2007, 25(6): 955-956. doi: 10.3321/j.issn:1000-8713.2007.06.039

去锌牛胰岛素的制备和鉴定

陈建锋 ^1, , 张薇 ^2, , 樊柳荫 ^3, , 任吉存 ^4, , 曹成喜 ^5,

1.上海交通大学生命科学技术学院,上海,200240

2.上海交通大学生命科学技术学院,上海,200240

3.上海交通大学生命科学技术学院,上海,200240

4.上海交通大学化学化工学院,上海,200240

5.上海交通大学生命科学技术学院,上海,200240

基金项目: 国家自然科学基金(20475036)

关键词：凝胶色谱(gel chromatography) , 电喷雾离子化质谱(ESI-MS) , 原子吸收光谱(AAS) , 乙二胺四乙酸(EDTA) , 去锌胰岛素(zinc-free insulin) , 制备(preparation) , 鉴定(identification)

Preparation and Identification of Zinc-Free Bovine Insulin

锌离子在胰岛素中扮演着非常重要的角色,这是因为通过金属离子与蛋白质之间的相互作用,使得胰岛素的结构发生变化并影响胰岛素的生物功能.因此,去锌胰岛素在金属和蛋白识别以及结构研究中是必需的.该文采用乙二胺四乙酸(EDTA)二钠盐与锌离子进行配合作用形成稳定的[Zn-EDTA]2-配合物来去除胰岛素中的锌离子,然后用Sephadex G-25柱对体系进行凝胶过滤,以除去胰岛素中的配合物和原有的苯酚,并用电喷雾离子化质谱对分离的物质进行鉴定.结果显示除去锌离子的胰岛素与EDTA配合物的分离效果良好.采用原子吸收光谱来检验胰岛素馏分中锌离子的去除效果,结果显示94.3%的锌离子被去除,表明EDTA配合锌离子的效果显著.所有结果均表明该方法可用来制备去锌牛胰岛素.

参考文献

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