为了在短时间内获得相对含量高的磷酸化肽段,以标准磷酸化蛋白质为模型对强阳离子交换色谱(SCX)分离磷酸化肽段体系的缓冲溶液和梯度设置进行了研究,并用酵母酶切肽段混合物考察了该路线在较复杂的样品中的应用.实验结果表明优化后的体系能够在30 min内分离出磷酸肽段,而且非磷酸化肽段的干扰很少,这样便相对提高了磷酸化肽段在质谱仪中的响应强度,重要的是该体系可以对复杂样品进行很好的分离.这说明SCX用于规模化磷酸化肽段富集的策略是可行的.本研究为磷酸化蛋白质组学规模化分析提供了实用技术.
参考文献
| [1] | Villen J,Beausoleil S A,Gerber S A.et al.Proc Natl Acad Sci U S A,2007,104(5):1488 |
| [2] | Annan R S.Huddleston M J,Verma R,et al.Anal Chem,2001,73(3):393 |
| [3] | Cantin G T,Venable J D,Cociorva D,et al.J Proteome Res,2006,5(1):127 |
| [4] | Bodenmiller B,Mueller L N,Mueller M,et al.Nat Meth-otis,2007,4(3):231 |
| [5] | Pandey A,Podtelejnikov A V,BIagoev B,et al.Proc Natl Acad Sci U S A,2000,97(1):179 |
| [6] | Wang J,Zhaag Y,Jiaag H,et al.Proteomics,2006,6(2):404 |
| [7] | BeausoleiJ S A,Jedrychowski M,Schwartz D,et a1.Proc Natl Acad Sci U S A.2004,101(33):12130 |
| [8] | Lim K B,Kassel D B.Anal Biochem,2006,354(2):213 |
| [9] | Zhang X,Herring C J,Romano P R,et al.Anal Chem,1998,70(10):2050 |
| [10] | Larsen M R,Thmgholm T E,Jensen O N,et al.Mol Cell Proteomics,2005,4(7):873 |
| [11] | Wang H,Duan J C,Yuan H M,et al.Chinese Journal of Chromatography(王晖,段继诚,袁辉明,等.色谱),2007,25(4):453 |
| [12] | Feng S.Ye M,Zhou H,et al.Mol Cell Proteomics,2007,6(9):1656 |
上一张
下一张
上一张
下一张
计量
- 下载量()
- 访问量()
文章评分
- 您的评分：
-
10%
-
20%
-
30%
-
40%
-
50%