β2-肾上腺素能受体是细胞表面受体的一种,它能通过偶联异源三聚体G蛋白将信号转导引入到细胞内部.本实验在成功克隆、表达β2-肾上腺素能受体的基础上,建立了一种两步柱色谱分离纯化目的蛋白质的方法.首先利用Ni2+螯合的高分辨纯化的预带电荷介质Sepharose High Performance与含有六聚组氨酸标签的蛋白质特异结合的性质,对目的蛋白质进行初步分离,接着运用快流速Q琼脂糖凝胶(Quaternary Sepharose Fast Flow)对其进行进一步的分离纯化.采用该方法得到的β2-肾上腺素能受体蛋白质经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和高效凝胶排阻色谱检测其纯度约为95%.结果表明该方法可以对重组猪β2-肾上腺素能受体进行有效的分离纯化.
参考文献
| [1] | Brouri F,Hanoun N,Mediani O,et al.Eur J Pharmacol,2004,485(1/2/3):227 |
| [2] | Olah M E,Stiles G L.Pharmacol Therapeut,2000,85(2):55 |
| [3] | Liggett S B.J Allergy Clin Immunol,1999,104(2):S42 |
| [4] | Tu W J,Yang Y,Yin K S.Foreign Medical Sciences:Pathophysiology and Clinical Medicine (屠文俊,杨玉,殷凯生.国外医学:生理、病理科学与临床分册),1995,15(2):87 |
| [5] | Li M Y,Li S F,Wang S X,et al.Biotechnology (李敏艳,李善法,王世祥,等.生物技术),2009,19(1):4 |
| [6] | Ramos-Jiménez J,Soria-Jasso L,López-Colombo A,et al.Biochem Pharmacol,2007,73(6):814 |
| [7] | Hill R A,Sillence M N.Protein Expression and Purification,1997,10(1):162 |
| [8] | Jia X G,Bian L J.Chinese Journal of Chromatography (贾信贵,边六交.色谱),2007,25(3):344 |
| [9] | Huang Y Y,Shen H,Wang D,et al.China Biotechnology (黄园园,沈红,王迪,等.中国生物工程杂志),2008,28(8):18 |
| [10] | Yang L,Jia L Y,Zou H F,et al.Chinese Journal of Biotechnology (杨利,贾凌云,邹汉法,等.生物工程学报),2000,16(1):74 |
| [11] | Bian L J,Yang X Y,Liu L.Chinese Journal of Chromatography (边六交,杨晓燕,刘莉.色谱),2006,24(2):135 |
| [12] | Hiraiwa M,Saitoh M,Arai N,et al.Biochimica et Biophysica Acta,1997,1341:189 |
| [13] | Zheng X H,Zhao X F,Yang R,et al.Chinese Science Bulletin (郑晓晖,赵新锋,杨荣,等.科学通报),2007,52(18):2111 |
上一张
下一张
上一张
下一张
计量
- 下载量()
- 访问量()
文章评分
- 您的评分：
-
10%
-
20%
-
30%
-
40%
-
50%