为了得到低成本的多肽,本文利用胰蛋白酶对酪蛋白进行了充分的酶解.采用分析级反相高效液相色谱-电喷雾质谱联用技术(RP-HPLC/ESI-MS)分析了酶解产物各组分的组成,并通过改变流动相的梯度洗脱程序,优化了分析级色谱条件以充分分离相对含量较高的多肽组分;将优化的分析级色谱条件直接放大到制备级RP-HPLC中,在程序控制下通过紫外吸收信号结合ESI-MS信号共同引导实现了多肽的全自动化分离和收集.整个过程方便快捷,经过这样一个单一的分离步骤,得到了多个纯度较高的多肽.除此之外,本文还考察了流动相的酸碱性、柱上样量等因素对该体系制备级分离的影响,并对一次分离中分辨率不好的亲水性多肽混合物进行了二次分离,得到了多个新的多肽.本文建立的多肽制备方法为多肽和多肽材料的广泛应用提供了一种选择.
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