基于整体材料的微流控芯片反相液相色谱-串联质谱平台用于蛋白质分析

色谱 , 2011, 29(6): 469-474. doi: 10.3724/SP.J.1123.2011.00469

基于整体材料的微流控芯片反相液相色谱-串联质谱平台用于蛋白质分析

梁玉 ^1, , 吴慈 ^2, , 戴忠鹏 ^3, , 梁作成 ^4, , 梁振 ^5, , 张丽华 ^6, , 张玉奎 ^7,

1.中国科学院分离分析化学重点实验室,大连化学物理研究所,国家色谱研究分析中心,辽宁大连,116023;中国科学院研究生院,北京,100039

2.中国科学院分离分析化学重点实验室,大连化学物理研究所,国家色谱研究分析中心,辽宁大连,116023;中国科学院研究生院,北京,100039

3.中国科学院分离分析化学重点实验室,大连化学物理研究所,国家色谱研究分析中心,辽宁大连,116023

4.中国科学院分离分析化学重点实验室,大连化学物理研究所,国家色谱研究分析中心,辽宁大连,116023

5.中国科学院分离分析化学重点实验室,大连化学物理研究所,国家色谱研究分析中心,辽宁大连,116023

6.中国科学院分离分析化学重点实验室,大连化学物理研究所,国家色谱研究分析中心,辽宁大连,116023

7.中国科学院分离分析化学重点实验室,大连化学物理研究所,国家色谱研究分析中心,辽宁大连,116023

基金项目: 科技部科技支撑计划(2008BAK41 B02;2009BAK59B02) 国家自然科学基金(20935004) 科技部基础研究计划(2007CB714503;2007CB914100)

关键词：微流控芯片 , 反相液相色谱 , 串联质谱 , 整体材料 , 蛋白质分析

Microchip-based reversed-phase liquid chromatography-tandem mass spectrometry platform for protein analysis

微流控芯片高效液相色谱-串联质谱系统具有高通量、高灵敏度等优点,已成为生物样品分析的热点领域之一.本文在玻璃芯片上以甲基丙烯酸十二酯(LMA)和三羟甲基丙烷三甲基丙烯酸酯(TMPTMA)为单体,制备了以聚丙烯酸酯整体材料为固定相的捕集柱和分离柱.通过在芯片通道末端连接细内径的毛细管作为芯片-质谱接口,并以常规的液相色谱泵和微阀控制流体,构建了芯片反相液相色谱-电喷雾串联质谱(RPLC-ESI-MS/MS)平台,并将其用于分析牛血清白蛋白(BSA)的酶解产物.经过3次平行分析,BSA的序列覆盖率分别为39.37％、37.89％和34.10％(相对标准偏差为7.3％).采用不同批次制作的芯片构建RPLC-ESI-MS/MS平台,对BSA酶解产物进行分析,其序列覆盖率相当.上述结果表明,该平台具有灵敏度高和重现性好等优点,有望用于蛋白质样品的快速分离和高灵敏度鉴定.

参考文献

[1]	Figeys D,Pinto D.Electrophoresis,2001,22(2):208
[2]	Mouradian S.Curr Opin Chem Biol,2002,6 (1):51
[3]	Lion N,Reymond F,Girault H H,et al.Curr Opin Chem Biol,2004,15(1):31
[4]	Freire S L S,Wheeler A R.Lab Chip,2006,6(11):1415
[5]	Peng Y,Pallandre A,Tran N T,et al.Electrophoresis,2008,29(1):157
[6]	Tran N T,Ayed I,Pallandre A,et al.Electrophoresis,2010,31(1):147
[7]	Ganthier G L,Grimm R.Drug Discovery Today,2006,3(1):59
[8]	Ehlert S,Tallarek U.Anal Bioanal Chem,2007,388(3):517
[9]	Wang X J,Zhu Y,Fang Q.Chinese Journal of Chromatography(王新珏,祝莹,方群.色谱),2011,29(2)：99
[10]	Vahey P G,Smith S A,Costin C D,et al.Anal Chem,2002,74(1):177
[11]	Fortier M H,Bonneil E,Goodley P,et al.Anal Chem,2005,77(6):1631
[12]	Yin H,Killeen K,Brennen R,et al.Anal Chem,2005,77(2):527
[13]	Tanaka T,Izawa K,Okochi M,et al.Anal Chim Acta,2009,638(2):186
[14]	Ishida A,Yoshikawa T,Natsume M,et al.J Chromatogr A,2006,1132(1/2):90
[15]	Reichmuth D S,Shepodd T J,Kirby B J.Anal Chem,2005,77 (9):2997
[16]	Liu J,Chen C F,Tsao C W,et al.Anal Chem,2009,81(7):2545
[17]	Levkin P A,Eeltink S,Stratton T R,et al.J Chromatogr A,2008,1200(1):55
[18]	Robotti K M,Yin H,Brennen R,et al.J Sep Sci,2009,32(20):3379
[19]	Lee J,Soper S A,Murray K K.J Mass Spectrom,2009,44(5):579
[20]	Sung W C,Makamba H,Chen S H.Electrophoresis,2005,26(9):1783
[21]	Koster S,Verpoorte E.Lab Chip,2007,7(11):1394
[22]	Liang Y,Cong Y,Liang Z,et al.Electrophoresis,2009,30(23):4034
[23]	Jia Z,Fang Q,Fang Z L.Anal Chem,2004,76(18):5597
[24]	Eeltink S,Geiser L,Svec F,et al.J Sep Sci,2007,30(17):2814

上一张下一张

计量

下载量()
访问量()

作者相关

文章评分

您的评分：
1

0%
2

0%
3

0%
4

0%
5

0%

材料期刊网