蜂蜜中外源性γ-淀粉酶残留量的测定

色谱 , 2012, 30(8): 777-781. doi: 10.3724/SP.J.1123.2012.04015

蜂蜜中外源性γ-淀粉酶残留量的测定

费晓庆 ^1, , 吴斌 ^2, , 沈崇钰 ^3, , 张睿 ^4, , 丁涛 ^5, , 李丽花 ^6,

1.江苏出入境检验检疫局食品实验室,江苏南京,210001

2.江苏出入境检验检疫局食品实验室,江苏南京,210001

3.江苏出入境检验检疫局食品实验室,江苏南京,210001

4.江苏出入境检验检疫局食品实验室,江苏南京,210001

5.江苏出入境检验检疫局食品实验室,江苏南京,210001

6.江苏出入境检验检疫局食品实验室,江苏南京,210001

基金项目: 江苏出入境检验检疫局科研项目(2011KJ40) 国家质量监督检验检疫总局科技计划项目(2011IK212)

关键词：液相色谱-同位素质谱联用法 , 凝胶柱色谱 , 酶反应 , γ-淀粉酶 , 大米糖浆 , 掺假 , 蜂蜜

Determination of exogenous γ-amylase residue in honey

采用液相色谱-同位素质谱联用法(LC-IRMS)建立了测定蜂蜜中外源性γ-淀粉酶残留量的方法.先采用凝胶色谱柱对蜂蜜样品进行预分离,将样品中所含的酶与糖分离开.根据γ-淀粉酶可将底物麦芽糖酶解为葡萄糖的原理,在55℃、pH4.5的0.03 mol/L磷酸盐缓冲液中将γ-淀粉酶与麦芽糖反应48 h后,采用LC分离麦芽糖和葡萄糖,以IRMS测定酶解产物葡萄糖的含量来确定γ-淀粉酶的残留量.本方法的线性范围为5～ 200 U/kg,定量限为5 U/kg,回收率为89.6％～ 108.2％,相对标准偏差为3.3％～4.9％.采用本方法对市售蜂蜜和大米糖浆共38个样本进行了考察,γ-淀粉酶的检出率为76.3％.为了进一步验证本方法的检测能力,测定了掺入15％(质量分数)大米糖浆的蜂蜜样品,测得γ-淀粉酶的含量为10.2 U/kg.本方法能够有效地从酶学的角度鉴定蜂蜜中是否含有大米糖浆.

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