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为了解促渗透剂对不同物质的促渗透能力,建立了采用高效液相色谱分离测定8个普萘洛尔衍生物的分析方法.采用盒式给药技术在离体角膜上皮侧给予普萘洛尔衍生物,内皮侧接收灌流液,用甲醇沉淀蛋白、高速离心后进样,采用Agilent Zorbax Extend色谱柱,以乙腈(A)-0.03% (v/v)磷酸水溶液(B)为流动相,在3%A~20%A间梯度洗脱,柱温30℃,检测波长205 nm.结果表明,该方法可在31 min内实现离体角膜灌流液中8个衍生物的完全分离和定量,线性范围为0.2 (0.1)~ 40.0 μmol/L,线性关系良好,相关系数均不小于0.9970.其加样回收率为91.12%~105.73%,日内精密度(相对标准偏差(RSD))为1.00%~11.63%,日间精密度为1.18%~18.58%,样本冻存、冻融稳定性良好.该法适用于离体角膜灌流、细胞小室培养等跨膜吸收研究中普萘洛尔衍生物的检测.

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