基于核酸适配体的微流控芯片酶反应器用于蛋白质的分析

色谱 , 2012, 30(11): 1127-1132. doi: 10.3724/SP.J.1123.2012.07019

基于核酸适配体的微流控芯片酶反应器用于蛋白质的分析

肖鹏 ^1, , 李大雷 ^2, , 满燕 ^3, , 耿利娜 ^4, , 吕雪飞 ^5, , 邓玉林 ^6,

1.北京理工大学生命学院,北京,100081

2.北京理工大学生命学院,北京,100081

3.北京理工大学生命学院,北京,100081

4.北京理工大学生命学院,北京,100081

5.北京理工大学生命学院,北京,100081

6.北京理工大学生命学院,北京,100081

基金项目: 科技部科技支撑计划(2009BAK59B01) 北京市科技专项(Z111102055311077)

关键词：高效液相色谱-串联质谱 , 胰蛋白酶 , 蛋白质 , 核酸适配体 , 芯片酶反应器

An enzyme reactor based on aptamer modified microfluidic chip for protein analysis

将核酸适配体作为胰蛋白酶固定化介质,制备了一种新型的微流控芯片酶反应器,并与高效液相色谱-串联质谱联用,搭建了在线分析平台；分别使用标准蛋白及混合蛋白样品对芯片的酶解效率及联用平台的分析能力进行了初步评价.结果表明,5 ng肌红蛋白经该平台分析后肽段覆盖率可达到37％；对500 ng混合蛋白进行3次平行分析,肽段覆盖率及相对标准偏差分别为44.3％、6.5％(牛血清白蛋白),65.0％、2.7％(肌红蛋白)和62.0％、5.6％(细胞色素c)；初步实验表明,该在线分析平台具有检测灵敏度高、重现性好、酶解效率高的特点,有望在蛋白质组学分析中发挥重要作用.

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