以细胞色素c(Cyt c)为碱性蛋白质模型,建立了毛细管电泳评价Cyt c与3种不同链长的单链脱氧核糖核酸(ssDNA)库相互作用的评价方法,研究了离子强度对Cyt c与ssDNA库相互作用的影响.比较了Cyt c与含有20、40和60个随机碱基序列的3种不同链长的ssDNA库的作用及基于未涂层毛细管和涂层毛细管的毛细管区带电泳方法.因碱性蛋白质在未涂层毛细管管壁上存在吸附,因此利用未涂层毛细管区带电泳不能区别3种ssDNA库与其作用的差异.利用涂层毛细管电泳法,在压力辅助的反向电压下,根据游离ssDNA库的峰面积变化可比较3种ssDNA库与细胞色素c的相互作用差异.结果表明,含有20个随机寡核苷酸链长的ssDNA库与Cty c的作用最强.此外,NaC1浓度显著影响Cyt c与ssDNA60库的作用.在优化的实验条件下,0.02 mol/L NaC1有利于两者的相互作用.调节盐浓度可抑制非特异性静电作用,能提高碱性蛋白质适配体的单轮筛选效率.利用未涂层毛细管电泳分析复合物及游离ssDNA库的峰面积变化,可优化有利复合物形成的盐浓度.
参考文献
| [1] | Tuerk C,Gold L.Science,1990,249:505 |
| [2] | Ellington A D,Szostak J W.Nature,1990,346:818 |
| [3] | Song K M,Lee S W,Ban C.Sensors,2012,12:612 |
| [4] | Guo L.Journal of International Pharmaceutical Research (郭磊.国际药学研究杂志),2010,37(4):249 |
| [5] | Butz K,Denk C,Fitscher B,et al.Oncogene,2001,20(45):6579 |
| [6] | Iliuk A B,Hu L H,Tao W A.Anal Chem,2011,83(12):4440 |
| [7] | Wu P,Gao Y,Zhang H,et al.Anal Chem,2012,84(18):7692 |
| [8] | Zhou Q,Liu Y,Shin D S,et al.Langmuir,2012,28:12544 |
| [9] | He X X,Zhao Y X,He D G,et al.Langmuir,2012,28:12909 |
| [10] | Li L L,Ge P H,Selvin P R,et al.Anal Chem,2012,84(18):7852 |
| [11] | Battig M R,Soontornworajit B,Wang Y.JACS,2012,134(30):12410 |
| [12] | Mascini M.Aptamers in Bioanalysis.Qu F,et al.,transl.Beijing:Chemical Industry Press(马可·马希尼.生物分析中的核酸适配体.屈锋,等.译.北京:化学工业出版社),2010 |
| [13] | Zhao Q,Le X C.Chinese Journal of Chromatography(赵强,乐晓春.色谱),2010,28(5):431 |
| [14] | Qu F,Liu Y,Ren X M,et al.Progress in Chemistry(屈锋,刘允,任肖敏,等.化学进展),2009,21(7/8):1576 |
| [15] | Berezovski M,Nutiu R,Li Y F,et al.Anal Chem,2003,75(6):1382 |
| [16] | Berezovski M,Krylov S N.Anal Chem,2005,77(5):152 |
| [17] | Petrov A,Okhonin V,Berezovski M,et al.JACS,2005,127(48):17104 |
| [18] | Berezovski M,Drabovich A,Krylova S M,et al.JACS,2005,127(9):3165 |
| [19] | Chinnapen D J F,Sen D.Biochem,2002,41:5202 |
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