建立了毛细管电泳表征多肽和糖蛋白稳定性的方法.分别以血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)和植物血球凝集素(PHA)、牛凝血酶(B-Thr)、人凝血酶(H-Thr)、辣根过氧化物酶(HRP)4种糖蛋白为多肽和糖蛋白的模式分子.从样品浓度、电泳缓冲液、样品溶液pH和离子强度等方面优化了血管紧张素Ⅱ的分离分析条件;从毛细管的选择、样品的电荷状态、电泳缓冲液的选择和分离电压的影响等方面讨论了糖蛋白的分离条件.Ang Ⅱ和4种糖蛋白的稳定性试验结果表明:Ang Ⅱ可在pH 7.4的硼酸盐缓冲液(0.02 mol/L)中于4℃下稳定放置48 h;4种糖蛋白可在pH 7.4硼酸盐缓冲液(0.2 mol/L)中于20,4,-20℃下稳定放置48 h;放置时间大于一周且小于四周时,在-20℃下各蛋白质均保持稳定;放置时间大于两周且小于四周时,只有HRP在上述3个温度下均保持稳定.该方法具有高效、快速、简单、低成本的特点,可广泛应用于多肽和蛋白质的稳定性表征.
参考文献
[1] | Basso N,Terragno N A.Hypertension,2001,38(6):1246 |
[2] | Tonnaer J A,Verhoef J,Wiegant V M,et al.J Chromatogr B,1980,183(3):303 |
[3] | Ahmad S,Simmons T,Varagic J,et al.PLoS One,2011,6(12):e28501 |
[4] | Zhou X,Wang X J,Tian H S,et al.Journal of Jilin University:Medicine Edition(周鑫,王晓杰,田海山,等.吉林大学学报),2010,36(3):518 |
[5] | Tenorio-L6pez F A,Zarco-Olvera G,Sánchez-Mendoza A,et al.Talanta,2010,80(5):1702 |
[6] | Huang Z D.Chinese Journal of Chromatography (黄志东.色谱),2000,18(1):80 |
[7] | Wojcik R,Dada O O,Sadilek M,et al.Rapid Commun Mass Spectrom,2010,24(17):2554 |
[8] | Kuroda Y,Yukinaga H,Kitano M,et al.J Pharm Biomed Anal,2005,37 (3):423 |
[9] | Hasan M N,Park S H,Oh E,et al.J Sep Sci,2010,33(23/24):3701 |
[10] | Chen T H,Misra T K,Liu C Y.Electrophoresis,2008,29(8):1651 |
[11] | Wang X L,Kumar S,Buck P M,etal.Proteins,2013,83(3):443 |
[12] | Lazaridis T,Karplus M.Biophysical Chemistry,2003,100(1/3):367 |
[13] | Scharnagl C,Reif M,Friedrich J.Biochimica et Biophysica Acta,2005,1749(2):187 |
[14] | Wu S H,Luo T S,Zhang C G,et al.Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae(吴少辉,罗廷顺,张成桂,等.中国实验方剂学杂志),2012,18(21):74 |
[15] | Kakehi K,Honda S.J Chromatogr A,1996,720(1/2):377 |
[16] | Yin L H,Xue J,Lin B C.Chinese Journal of Analytical Chemistry(尹利辉,薛俊,林秉承.分析化学),1996,24(12):1464 |
[17] | Moring S E,Colburn J C,Grossman P D,et al.LC-GC,1990,8(1):34 |
上一张
下一张
上一张
下一张
计量
- 下载量()
- 访问量()
文章评分
- 您的评分:
-
10%
-
20%
-
30%
-
40%
-
50%