以羟乙基纤维素(HEC)和四甲氧基硅烷(TMOS)为原料,利用溶胶-凝胶技术,通过TMOS的水解和缩聚反应制得了HEC/SiO2凝胶复合物,并用此凝胶复合物对葡萄糖氧化酶(GOD)进行包埋固定化.探讨了给酶量、pH值和温度等因素对固定化GOD活力的影响,得到的最佳固定化条件是给酶量21 mg,磷酸盐缓冲液pH值为6.5,温度为32 ℃,在此条件下固定化GOD的活力可达1 000 μmol/(min*g)(载体质量以干态为基准)以上,约为游离GOD活力的50%.同时研究了固定化GOD的基本性质,结果表明,固定化GOD的最适pH值和最适温度分别为5.2和32 ℃,米氏常数Km为7.94 mmol/L,与游离GOD相比,固定化GOD的反应稳定性、贮存稳定性和热稳定性均有不同程度的提高.
参考文献
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