建立了一种基于荧光各向异性原理均相测定蛋白酶及其抑制剂的方法. 具有如下特点:灵敏度高(可测到纳克级的蛋白酶);是一种均相检测方法,可对酶反应体系进行实时跟踪检测;作用底物是蛋白酶的天然底物-蛋白质;适用的pH值范围宽(pH 2.0～10.0),可用于酸性、中性和碱性介质中蛋白酶的测定;所用荧光标记物TMRITC的发射波长(581 nm)大于荧光素类(520 nm),有利于减少散射光的干扰,提高了荧光各向异性测量的稳定性. 还可应用于蛋白酶抑制剂的检测.
参考文献
| [1] | Rozhin J,Gomez A P,Ziegler G H,et al.Cancer Res[J],1990,50:62 |
| [2] | Maeda H,Yamamoto T.Biol Chem Hoppe Seyler[J],1996,377(4):217 |
| [3] | Lunen B O,Tappel A L.Anal Biochem[J],1970,36:22 |
| [4] | Edwards R,Townshend A.Stoddart Anal[J],1995,120:117 |
| [5] | Robertson B D,Kwan-Lim G E,Maizels R M.Anal Biochem[J],1988,172(1):284 |
| [6] | Brown T L,Yet M G,Wold F.Anal Biochem[J],1982,122:164 |
| [7] | Gutierrez O A,Salas E H,Yanko L,et al.Anal Biochem[J],2002,307(1):18 |
| [8] | Joseph R L.Principles of Fluorescence Spectroscopy(Sencond Edition)[M].New York:Kluwer Academic/Plenum Publishers,1999 |
| [9] | Hiroshi M.Anal Biochem[J],1979,92:222 |
| [10] | CHEN Guo-Zhen(陈国珍),HUANG Xian-Zhi(黄贤智),XU Jin-Gou(许金钩),et al.Fluorescence Analytical Method(荧光分析法)[M],2nd Edn(第2版).Beijing(北京):Science Press(科学出版社),1990 |
| [11] | Stellmach(著).QIAN Jia-Yuan(钱嘉渊)Trans(译).Enzymes Assay Methods(酶的测定方法)[M].Beijing(北京):China Light Industry Press(中国轻工业出版社),1992 |
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