宋玉玲
,
汪海林
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2010.01123
发展了一种超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)检测脱氧核糖核酸(DNA)分子中8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)的方法.DNA分子在酶解过程中,脱氧鸟苷(dG)易被氧化形成8-OHdG,从而使得8-OHdG的检测结果不准确.通过加入甲磺酸去铁铵作为保护剂,有效地避免了酶解过程造成的dG氧化.酶解液通过超滤膜(截留相对分子质量为 3000的分子)处理,有效去除大量蛋白分子后,直接进行UPLC-MS/MS测定.采用外标法定量,在17.6～1400 fmol范围内,8-OHdG的峰面积与其物质的量具有良好的线性关系,相关系数为 0.9998.利用本方法测定了小牛胸腺DNA中8-OHdG的含量(用比值8-OHdG/106dG表示)为12.9±2.35,与前人报道的检测结果一致.本方法也可以应用于评价各种氧化因素引起的DNA氧化损伤.
关键词:
超高效液相色谱-串联质谱
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8-羟基脱氧鸟苷
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脱氧鸟苷
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脱氧核糖核酸
,
小牛胸腺
