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酶切过程中肽段过烷基化对蛋白质定性和定量分析的影响

王继峰 , , , 马成 , 钟儒刚 , 钱小红 , 应万涛

色谱 doi:10.3724/SP.J.1123.2013.04041

蛋白质的还原-烷基化是蛋白质酶切中的重要步骤,常用的烷基化试剂是碘乙酰胺(IAA),但是IAA除了和半胱氨酸发生反应,也可能和其他多种氨基酸发生副反应.我们模拟常规的酶切条件,系统地研究了蛋白质真实酶切时所有酶切肽段发生烷基化的情况.结果表明,多种氨基酸可以发生烷基化,其趋势为:半胱氨酸>肽段N端氨基酸>天冬氨酸>谷氨酸>组氨酸>天冬酰胺>赖氨酸>酪氨酸,同时也发现同一肽段上的氨基酸烷基化具有排他性和聚集性.根据定性结果,采用质谱多反应监测(MRM)技术对多个肽段进行了定量分析,评估了过烷基化对蛋白质定量分析的影响.该研究结果表明,过量的烷基化修饰对蛋白质的定性与定量分析都可能产生较大影响.在蛋白质组学研究的样本处理流程中,应避免样本的过烷基化.

关键词: 液相色谱 , 质谱 , 多反应监测 , 蛋白质组学 , 烷基化 , 碘乙酰胺

等电聚焦预分离用于肝癌细胞分泌蛋白质组的分级与鉴定

李贤煜 , , 应万涛 , 钱小红

色谱 doi:10.3724/SP.J.1123.2013.02010

分泌蛋白质组(secretome)是指在特定的时空条件下,细胞、组织等分泌的全部蛋白质.分泌蛋白质组可能包含了大量的疾病诊断生物标志物,因此其相关研究越来越受到重视.分泌蛋白质组的组成高度复杂且浓度范围宽,这对分析方法提出了挑战.建立有效的蛋白质或肽段预分离策略,将有利于分泌蛋白质的高覆盖率鉴定.本研究以肝癌细胞系MHCC97L的无血清培养分泌蛋白质为研究对象,采用一种新型等电聚焦预分离(OFFGEL)系统,考察了肽段水平的分级对蛋白质鉴定结果的影响.结果表明,分离后各馏分中肽段的等电点分布与理论预测基本一致,每个馏分中单独鉴定的肽段比例接近80%,显示了该系统对肽段的高分辨分离能力结合生物质谱技术,在肝癌细胞分泌系统中鉴定了 2995个蛋门质,显示了该系统在复杂体系蛋白质组研究中的应用潜力.

关键词: 等电聚焦 , 预分离 , 分泌蛋白质组 , 分级 , 鉴定 , 肝癌细胞

一种的静态轧制过程有限模拟方法

南建平

钢铁研究 doi:10.3969/j.issn.1001-1447.2006.04.013

提出了一种将欧拉法与拉格朗日法结合起来的静态轧制过程有限模拟新方法.其主要内容包括:在轧制件纵向上用欧拉坐标, 厚度和宽度方向上用拉格朗日坐标,时间变量是独立的,计算轧制件厚度和宽度方向上的实际位移时采用的流线形积分改用沿纵向的欧拉坐标一积分.

关键词: 欧拉坐标 , 拉格朗日坐标 , 轧制 , 有限

的稀土Eu,Tb(Ⅲ)β-二酮三配合物的合成与光谱性质

程果 , 魏长平 , 任晓明 , 王贺

中国稀土学报

采用Claisen缩合反应合成了一种β-二酮1-(4-氨基苯)-3-苯基丙烷-1,3-二酮(L:C15H13NO2),以元素分析和1H NMR谱确定了其组成,核磁和红外分析结果表明L主要以烯醇式存在.以L为第一配体,分别以邻菲罗啉(phen),2,2′-联吡啶(bipy)为第二配体,合成了的稀土Eu,Tb(Ⅲ)三配合物.通过元素分析、红外光谱、紫外光谱、磷光光谱和荧光光谱对合成的配合物进行了表征.荧光光谱表明:稀土铽配合物的发光性能优于稀土铕配合物,进一步研究表明配体L与Tb3+间能级差较匹配,分子内传能效率高;phen对配合物的荧光敏化效果优于bipy,表明第二配体的刚性和共轭性越大,配合物的发光性能越好.

关键词: 稀土配合物 , β-二酮 , 合成 , 光谱性质 , 能级

的β-二酮及其Eu(Ⅲ)三配合物的合成与发光研究

向能军 , 李狄豪 , 王芸芸 , 龚孟濂 , 梁万里 , 石建

中国稀土学报

合成了一种的β-二酮,4-甲氧基联苯甲酰三氟丙酮(1-(4'-meothoxybiphenyl-4yl-)-4,4,4,-trifluoro-butane-1,3-dione,MBPTFA),以元素分析和1H-NMR谱确定了其组成;进而以MBPTFA作第一配体和邻菲罗啉(1,10-phenanthroline,Phen)为第二配体,与EuGl3反应,合成了一种三配合,Eu(MBPTFA)3Phen.用元素分析、红外、紫外-可见吸收光谱和荧光光谱进行了表征.荧光分析结果表明:配体本身是一种良好的蓝色发光材料;配合物中的有机配体能够有效地的把吸收的能量传递给中心Eu3+离子,强烈敏化Eu3+发光,且发射谱线很窄,主发射峰为Eu3+的5Do-7F2发射.这对寻找新型稀土配合物发光材料和制备有机电郅发光器件具有一定的价值.

关键词: Eu(Ⅲ) , β-二酮 , 配合物 , 发光 , 电子传导 , 稀土

Fe-xCr-10Al (x=0, 5, 10)合金在900 ℃的氧化: 第三组作用的例子

张志刚 , P.Y.Hou , 牛焱

金属学报

通过研究Fe-10Al, Fe-5Cr-10Al和Fe-10Cr-10Al(原子分数, %) 合金在900℃的氧化行为, 分析了二Fe-Al合金形成选择性 氧化铝膜所需的临界铝浓度. 讨论了三Fe-Cr-Al 合金形成保护性氧化膜的机理, 对于不发生Al的内氧化的 情况, 提出合金中第三组Cr的作用机制的新解释.

关键词: Fe-xCr-10Al , mixed external scale , selective oxidation

Fe-xCr-10Al(x=0,5,10)合金在900℃的氧化:第三组作用的例子

张志刚 , P.Y.Hou , 牛焱

金属学报 doi:10.3321/j.issn:0412-1961.2005.06.017

通过研究Fe-10Al,Fe-5Cr-10Al和Fe-10Cr-10Al(原子分数,%)合金在900℃的氧化行为,分析了二Fe-Al合金形成选择性氧化铝膜所需的临界铝浓度.讨论了三Fe-Cr-Al合金形成保护性氧化膜的机理,对于不发生Al的内氧化的情况,提出合金中第三组Cr的作用机制的新解释.

关键词: Fe-xCr-10Al , 昆合外膜 , 选择性氧化 , 第三组作用

空穴长大延性损伤模型

, 谢晓龙 , 李明辉

金属学报

金属材料在复杂应力状态下的延性损伤与断裂是金属塑性成形领域的难点之一。本文以45中碳钢为研究对象,进行了拉伸、压缩、扭转、精冲试验,并结合有限对各实验过程中的应力三轴度和延性损伤进行了分析,提出了金属材料的三种延性损伤机理:无空穴影响剪切损伤、剪切型空穴损伤和拉伸型空穴损伤。在此基础上,提出了一个的基于空穴长大的延性损伤模型,能够较准确地预测材料拉伸、精冲过程中延性断裂的出现,扩大了损伤模型的预测范围。

关键词: 空穴 , stress triaxiality , ductile damage , ductile fracture

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