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亲水作用色谱法测定组织中全基因组DNA甲基化水平

张良滔 , 张立 , 张俊杰 , 刘春安 , 蔡春

色谱 doi:10.3724/SP.J.1123.2011.00342

建立了亲水作用色谱(HILIC)测定组织中全基因组DNA甲基化水平的方法.采用苯酚-氯仿提取组织中的DNA,提取的DNA用88%甲酸在140℃下裂解,经N2吹干后,加乙腈-水(9:1,v/v)溶解,用Waters BEH HILIC柱进行分离,在277 nn波长下检测胞嘧啶(Cyt)及5-甲基胞嘧啶(5-mCyt)含量.结果表明,以乙腈-10 mmol/L甲酸铵溶液(94:6,v/v)为流动相,流速为0.5 mL/min,Cyt与5-mCyt分离较好,保留时间分别为2.6与3.1min.胞嘧啶的线性范围为1~900 μmol/L,相关系数为0.999 9;5-甲基胞嘧啶的线性范围为1~64 μmol/L,相关系数为0.999 8.胞嘧啶和5-甲基胞嘧啶的检出限为54 nmol/L(柱中为0.54 pmol),定量限为250 nmol/L(柱中为2.5 pmol);在5~900 μmol/L的添加水平下,胞嘧啶和5-甲基胞嘧啶的平均加标回收率为94.7%~100.5%,相对标准偏差小于1.48%.用该方法检测了结肠癌组织中DNA甲基化水平,结果显示该癌组织中全基因组的DNA甲基化均值为4.0%.该方法快速、简单,稳定性好,灵敏度较高,能满足全基因组DNA甲基化的检测要求.

关键词: 亲水作用色谱 , 全基因组DNA甲基化 , 组织 , 结肠癌

液相色谱-串联质谱分析组织中基因组脱氧核糖核酸羟甲基胞嘧啶水平

陈丽宇 , 张立 , 张良滔 , 蔡春

色谱 doi:10.3724/SP.J.1123.2011.12015

5-羟甲基胞嘧啶通过阻止脱氧核糖核酸(DNA)甲基化转移酶l(DMNT1)甲基化胞嘧啶来影响DNA甲基化的程度.本文建立了液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)测定组织中全基因组5-羟甲基胞嘧啶水平的方法.采用苯酚-氯仿提取组织DNA.提取的DNA用88%甲酸在140℃下裂解,DNA裂解液加入同位素胞嘧啶作内标,经N2吹干后,加乙腈(9:1.v/v)溶解,用LC-MS/MS检测5-羟甲基胞嘧啶的含量,并计算全基因组中5-羟甲基胞嘧啶的水乎.结果表明,5-羟甲基胞嘧啶的线性范围为0.1~30 ng/mL,相关系数为0.996 9,检出限(信噪比为3计)和定量限(信噪比为10计)分别为0.057 ng/mL和0.090 ng/mL;日内相对标准偏差和日间相对标准偏差分别为5.13%和6.24%;加标回收率为90.24%~97.53%.用该方法检测了大鼠大脑组织DNA羟甲基化水平,平均结果为0.66%.该方法简便,重现性好,灵敏度较高,能满足全基因组5-羟甲基胞嘧啶定量检测的要求.

关键词: 液相色谱-串联质谱 , 5-羟甲基胞嘧啶 , 脱氧核糖核酸羟甲基化 , 组织

膜对不锈钢着色膜性能的影响

程作慧 , 薛永强 , 汤芝平

材料保护

膜处理对不锈钢着色膜的耐磨性和耐蚀性有重要的影响.研究了2种不同膜方法处理后膜的耐磨性和耐蚀性,利用扫描电镜及X射线能谱仪对膜处理前后着色膜的表面形貌和成分进行了分析,讨论了膜处理对彩色不锈钢耐磨性和耐蚀性的影响.结果表明:经电解膜处理后着色膜的耐磨性和耐蚀性明显优于经化学膜处理后的着色膜;膜前着色膜疏松、柔软、不耐磨、易被污物沾染,电解膜处理后由于膜中Cr、O的富集,膜上微孔基本消失,增强了膜的耐磨性能和耐蚀性能.

关键词: , 着色 , 不锈钢 , 耐磨性 , 耐蚀性

直接蒸发式冰蓄冷空调的蓄冰槽融冰强化换热

肖睿 , 何世辉 , 杜艳利 , 黄冲 , 冯自平 , 国德防 , 崔昌学 , 杜光林

工程热物理学报

现有的直接蒸发式冰蓄冷空调蓄冰槽内在融冰运行时都存在不利于传热的较大垂直温差.本文通过在蓄冰槽中下部位置处设置水平交叉盘管,使蓄冰槽内的直冰柱易于断裂,从而改善槽内自然对流条件,达到强化换热的目的.实验表明,水半盘管的布置明显减小了蓄冰槽内在融冰过程中的上下层温差,传热过程得到强化,融冰速度加快,制冷系统的COP也相应得到提高.

关键词: 直接蒸发 , 冰蓄冷 , 蓄冰槽 , 水甲盘管 , 强化传热

钢在厦门海域飞溅带腐蚀数学模型分析

林志 , 宋文桑

腐蚀科学与防护技术

钢在厦门海域飞溅带腐蚀数学模型分析林志,宋文桑(中国船舶工业总公司七二五研究所厦门分部,厦门361002)根据暴露在厦门试验平台飞溅带几种钢8年的腐蚀数据,按大气腐蚀常用的数字模型:F=KT”(。进行曲线拟合,并进行二次回归分析,获得相关系数大于0.95的回归方程:F-A+BT’+C/T’(2,讨论和分析回归系数与耐蚀性的关系,从而了解不同钢种腐蚀变化规律.TablelLnF—Lnk+nLnt,F—A+BTZ+C/TZ(F:mm,T:a)国家自然科学基金重大项目选用的....

关键词:

钢在厦门海域全浸和潮差区的腐蚀行为分析(摘要)

林志 , 宋文桑

腐蚀科学与防护技术

钢在厦门海域全浸和潮差区的腐蚀行为分析(摘要)林志,宋文桑(中国船舶工业总公司七二五研究所厦门分部,厦门361002)根据暴露在厦门海域全浸区、潮差区几种钢8年腐蚀试验结果,讨论不同的合金元素对低合金钢局部腐蚀发展倾向的影响;应用回归分析技术,计算不同钢种在潮差区平均腐蚀速度产生”逆转”的时间,讨论分析影响”逆转”现象的因素.l碳钢和IE#全钢局部腐蚀发展趋势全浸区8年取样处理时发现两种含Cr钢和09MnNb(济)钢的内锈....

关键词:

GH718合金氢渗透特性的研究

, 孙秀魁 , 刘清泉 , 陈文绣

中国腐蚀与防护学报

GH718合金氢渗透特性的研究徐,孙秀魁,刘清泉,陈文绣(中国科学院金属研究所,快速凝固非平衡合金国家重点实验室沈阳110015)1前言GH718(INCONEL718)合金广泛用作为涡轮叶片、氢燃发动机、核反应堆器壁等部件的材料.由于使用环境中氢气氛的存在,选材时必须考虑氢的进入与传输对合金性能的影响.尽管此合金的氢渗透数据曾有报导山,但关于合金的组织结构对氢渗透和扩散特性的影响仍不十分?...

关键词: null , hydrogen diffusion , superalloy , precipitation-phase

湿空气掠过竖直冷表面凝结的实验研究

李成 , 李俊明

工程热物理学报

实验研究了湿空气掠过普通铝箔、亲水铝箔以及浸油处理后的直冷表面凝结时的显热和潜热传递,结果表明:湿空气凝结速率不高时,亲水表面上的凝结液更易于铺展,质量传递性能较好,比易于成珠的普通表面传热性能好.油污的存在增加了亲水表面质量传递和热量传递的阻力,但对普通表面的影响很小;较低的凝结速率使凝结液流动复杂化,流态由重力和表面张力共同作用,因此传热和传质的类比与膜状凝结理论值相差较大;凝结液呈现不规则液滴凝结,生长以及聚合现象.

关键词: 湿空气 , 凝结 , 竖直表面 , 油浸

SU-8胶制备三维微电极结构研究

文春明 , 尤政 , 温志渝 , 王晓峰 , 陈李

功能材料

为了增大MEMS超级电容器电极结构的表面积,提高MEMS超级电容器的电荷存储能力,研究了利用SU-8胶制备高深宽比三维电极微结构.经过基片清洗、涂胶、前烘、曝光、后烘、显影、膜等过程,制备了深宽比为6的微结构.分析讨论了微结构制备过程中基底洁净度和升降温速度及曝光、显影时间等因素对结构制备的影响.实验结果表明,用SU-8胶制备高深宽三维电极微结构,能在相同底面积的基础上有效增加电板结构的表面积,提高单位底面积的电容器储能密度.

关键词: 三维微结构 , SU-8光刻胶 , 高深宽比 , 超级电容器 , MEMS

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