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苹果酸酶结合域定点突变对烟酰胺腺嘌呤二核苷酸类似物催化性能的影响

侯淑华 , 纪德彬 , 刘武军 , 王磊

应用化学 doi:10.11944/j.issn.1000-0518.2016.04.150268

通过对苹果酸酶(ME)辅酶结合域L310、Q401、I404饱和位点突变库与辅酶烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)类似物库的高通量筛选,研究了苹果酸酶结合域位点对NAD+及其类似物(B1~B7)催化活性的影响.结果表明,突变后酶ME-Q401H/L404T对类似物B4的kcat/Km是野生型酶的50倍;突变后酶ME-L310M/Q401N对类似物B4的kcat/Km是野生型酶的16倍,对类似物B3的kcat/Km是野生型酶的5倍,因此通过对结合域定点突变,NAD+类似物的催化活性得到提高.

关键词: 苹果酸酶 , 定点突变 , 辅酶活性

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