高亮
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乔晓强
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梁振
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张丽华
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霍玉书
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张玉奎
色谱
建立了基于在线二维弱阴离子交换色谱-反相液相色谱(2D-WAX-RPLC)的蛋白质分离系统,并用于不同生长时期鹿茸的比较蛋白质组分析.以5种标准蛋白质的混合物为样品,考察了系统的重现性.通过改变标准蛋白质之间的浓度比,研究了该系统进行蛋白质相对定量的能力.在此基础上,针对4个不同生长时期的鹿茸样品,分别采用5种不同的方法进行蛋白质提取,经2D-WAX-RPLC分离后,收集各生长时期对应蛋白质的峰高最大比超过2的组分.酶解后,采用微柱反相液相色谱-串联质谱(μRPLC-MS/MS)进行肽段的分离鉴定;共从9个差异蛋白质峰中鉴定到了22个差异蛋白质.研究结果表明,利用基于蛋白质水平的在线二维液相色谱分离技术找寻差异蛋白质,具有重现性好、自动化程度高等优点,可用于开展比较蛋白质组学的研究.
关键词:
在线二维液相色谱
,
鹿茸
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蛋白质组
,
不同生长时期
,
比较蛋白质组学
刘士佳
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乔晓强
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杨艳军
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闫宏远
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2014.07022
发展新型高效的亲水作用色谱分离材料对于极性化合物的分离分析具有重要的意义。本文设计合成了一种新型咪唑嵌合的氨基亲水作用色谱固定相（ Sil-IEASP），并分别采用傅里叶变换红外光谱仪、热重分析仪和元素分析仪对该固定相进行了表征，结果表明该固定相制备成功。以核苷和核酸碱基为样品，分别考察了流动相中的水含量、盐浓度和 pH对其保留的影响，结果表明所发展的固定相具有良好的亲水作用特性；此外，缓冲盐浓度和 pH几乎不影响上述物质的保留。进一步将该固定相应用于分离尿嘧啶、腺嘌呤、胞嘧啶、尿苷和3种位置异构体（邻三联苯、间三联苯和苯并菲），与常用的氨基固定相相比，本文所发展的固定相具有更好的分离效果，有望在亲水作用色谱分离领域发挥潜在的应用价值。
关键词:
亲水作用色谱
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咪唑嵌合固定相
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极性化合物
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位置异构体
