王灼维
,
彭福利
,
王媛
,
童维
,
任艳
,
徐宁志
,
刘斯奇
色谱
膜蛋白质在变性剂作用下能够较充分地溶解.根据这一特点,我们试图在变性剂溶液中采用串联离子交换色谱法分离小鼠肝脏膜蛋白质.将小鼠肝脏膜蛋白质溶解于含有4 mol/L 尿素,20 mmol/L 三羟甲基氨基甲烷(Tris)-盐酸缓冲液(pH 9.0)中,用Q-Sepharose FF和Sephacryl S-200HR树脂组成的色谱柱结合大部分溶解的膜蛋白质,然后采用氯化钠线性梯度洗脱蛋白质,分步收集后采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)进一步分离洗脱组分的蛋白质.利用胶内胰蛋白酶消化技术将SDS-PAGE胶内分离的蛋白质降解为相应的肽段,然后以反相高效液相色谱分离和离子阱质谱仪鉴定肽段.根据文献报道和蛋白质的功能分类,在所鉴定的392个蛋白质中有306个可能为膜蛋白质或膜结合蛋白质.蛋白质的疏水性计算表明,GRAVY(grand average of hydropathicity)得分大于或等于0.00的蛋白质有83个.综上所述,我们有理由认为本实验方法基本符合小鼠肝脏膜蛋白质组学研究的要求.
关键词:
多维离子交换色谱
,
十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳
,
反相高效液相色谱
,
串联质谱
,
膜蛋白质
,
小鼠肝脏
刘海峰
,
李杨
,
任艳
,
王正胜
,
赵锦波
,
王玉荣
高分子材料科学与工程
采用活性阴离子聚合技术,以BuLi为引发剂,DVB为偶联剂,在环己烷体系中合成了星形多官能团大分子PS-b-PI.然后以此星形大分子作为接枝剂,通过阳离子聚合,合成了一种在每个星形大分子的臂上接枝几个聚异丁烯的新型支化聚合物,并对其进行了GPC、1H-NMR、FT-IR等分析表征,讨论了不同的加料顺序对其的影响,1H-NMR结果表明其接枝效率达80%左右.
关键词:
阴离子聚合
,
阳离子聚合
,
星形大分子
,
支化聚合物
,
接枝
