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赖氨酸胍基化对蛋白质组分析的影响

郑昊 , 毛家维 , 潘彦博 , 刘忠山 , 刘哲益 , 叶明亮 , 邹汉法

色谱 doi:10.3724/SP.J.1123.2014.01003

赖氨酸胍基化在蛋白质组学定性和定量研究中起着重要作用,本文系统分析了胍基化前后,HeLa 细胞蛋白质经胰蛋白酶酶解产生的3种不同类型肽段的质谱鉴定情况,并探讨了不同肽段质谱响应改变的内在原因。发现赖氨酸在侧链能选择性地发生胍基化反应(其选择性达到96.8%),转化为高精氨酸,碱性增强。因此在正离子质谱模式下,C 端为赖氨酸的肽段产生了更多的 y 离子,提供了许多新的离子碎片信息。在鉴定结果中,此类肽段所占总肽段的比例由原来的51.7%上升为57.3%,并且有1015条新的肽段被检测到。对于不含有赖氨酸的肽段,其鉴定结果在胍基化前后基本没有变化。结果表明,胍基化可以在一定程度上提高质谱鉴定的灵敏度和互补性,提高蛋白质分析的覆盖率。

关键词: 质谱 , 蛋白质组学 , 胍基化 , 肽段碎裂

含多面体低聚倍半硅氧烷杂化毛细管整体柱的制备及修饰

欧俊杰 , 林辉 , 刘哲益 , 张振宾 , 董靖 , 邹汉法

色谱 doi:10.3724/SP.J.1123.2013.03012

本文采用自由基聚合法原位制备了两种杂化毛细管整体柱.首先以含有一个甲基丙烯酸基团的多面体低聚倍半硅氧烷(POSS)试剂(Bu-POSS)为单体、以含有多个甲基丙烯酸基团的POSS试剂(POSS-MA)为交联剂在二元致孔剂(正丙醇/聚乙二醇400)和引发剂(偶氮二异丁腈)存在下发生热引发聚合,在毛细管中形成聚(Bu-POSS-co-POSS-MA)杂化整体柱;另外仅以POSS-MA为单体在相同条件下制备聚(POSS-MA)杂化整体柱,并将这两种杂化整体柱应用于小分子的毛细管液相色谱(cLC)分析.结果表明,含POSS杂化整体柱具有制备简单、重现性好以及稳定性高的特点.此外,利用聚(POSS-MA)杂化整体柱表面剩余的甲基丙烯酸基团,可以将功能单体(甲基丙烯酸硬脂酸酯等)化学键合到整体柱上,不但可以提高色谱柱效,而且使其具有不同的选择性.本文所发展的以POSS试剂为原料采用自由基聚合法制备杂化整体柱的方法为新型杂化整体柱的制备提供了一种新思路.

关键词: 多面体低聚倍半硅氧烷 , 整体柱 , 有机-无机杂化 , 毛细管液相色谱

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