杜蓉
,
陈保文
,
郭磊
,
李阳
,
谢剑炜
,
王国治
,
周宏兵
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2008.05.002
采用反相高效液相色谱法(HPLC)构建了49种分枝杆菌标准菌株的分枝菌酸指纹图谱库,并对分枝杆菌进行分型鉴定.菌株经培养(对于慢生长分枝杆菌培养3周,快生长分枝杆菌培养1周)后,取两植菌勺的量,皂化1h后,于4℃下储存.通过酸化方法提取分枝菌酸.并用4-溴苯甲酰基溴衍生化,以HPLC分析分枝杆菌衍生物,并以其峰形的分布及峰的相对保留时间、相对峰高为指标对分枝杆菌进行分型鉴定.该法重现性良好,各峰保留时间的相对标准偏差为0.13%～1.07%.根据构建的49种<伯杰细菌鉴定手册>中所载入的分枝杆菌标准菌株的分枝菌酸指纹谱库,发现不同菌种的分枝菌酸的指纹图谱分别具有单簇峰、双簇峰、三簇峰(含多簇峰)的特征.依据相对保留时间和相对峰高的不同,对49种分枝杆菌中的41种进行了分型.结果表明,所建立的反相HPLC法可快速准确地对分枝杆菌进行分型鉴定.
关键词:
反相高效液相色谱法
,
分枝菌酸
,
指纹图谱
,
分枝杆菌
,
分型
,
鉴定
,
结核分枝杆菌
周宏兵
,
向日良夫
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2000.01.003
合成了一种用于醇类分析的高灵敏度的荧光衍生化试剂2-(4-羧基苯基)-4,5-萘并咪唑(CNI),将其在二氯甲烷中于80 ℃条件下与醇缩合成酯 ,并采用RP-HPLC法进行分离检测,色谱柱为Zorbax Bp C8柱(250 mm×4.6 mm i.d.) ,流动相为V(乙腈)∶V(甲醇)=90∶10的溶液,荧光检测波长λex 345 nm, λem 485 nm.同时,测定了人血清中的胆固醇,其最低检出质量浓度为1.0 μg /L.
关键词:
荧光衍生化试剂
,
高效液相色谱法
,
2-(4-羧基苯基)-4,5-萘并咪唑
,
醇类测定
