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基于液相色谱信息的西青果化学成分抑制α-葡萄糖苷酶活性数学模型的构建

王定颖 , 朱靖博 , 丁燕 , 寇自农 , 杨兰苹

色谱

中药提取物是一个组成复杂、机理不明晰的混合物体系,其对靶标的作用是其中所有化合物的综合影响,如何表征和评价其生物活性值得深入研究。本文采用羟丙基葡聚糖凝胶色谱柱分离西青果乙醇提取物,得到29组成分连续变化的样品,采集样品的色谱信息(254 nm 波长下)与活性信息,运用逐步回归法建立成分的峰面积( Vi,自变量)与活性(以对酶的抑制率(W)表示,因变量)之间的数学方程,确定对活性影响显著的成分。结果表明,29组样品包含55个峰,这些峰对应成分的峰面积( Vi,i =1,2,…,55)与 W 之间存在数学关系:W = V7×(-0.034±0.013)+V18×(-0.155±0.051)+V29×(-0.142±0.028)+V4×(0.079±0.020)+V11×(0.074±0.028)+V36×(-0.117±0.053)+85.669±4.476,复相关系数 R =0.854,显著度=0.037,稳健性良好,对活性影响最显著的物质为第18、29、36、4、11和7号峰对应的化合物。该方法同样适用于不同中药资源的成分与多种不同活性等方面的研究,对于中药的研发具有重要意义。

关键词: 高效液相色谱 , 逐步回归分析 , 多元线性回归方程 , 数学模型 , α-葡萄糖苷酶 , 活性 , 抑制 , 西青果

自动真空液相色谱装置的研制及其在五味子成分分离中的应用

朱靖博 , 刘宝月 , 单世波 , 丁燕 , 寇自农 , 萧伟

色谱 doi:10.3724/SP.J.1123.2015.04026

为满足天然产物高效分离的需求,本文研制了自动真空液相色谱(AUTO-VLC)装置并用于五味子石油醚萃取物的分离。该装置由自主设计的流动相储备系统、10通分流切换阀、3通切换阀、3个不同规格的动态轴向压缩色谱柱、10通馏分收集阀和馏分收集器组成,采用可编程逻辑控制器(PLC)S7-200实现了分离过程的不同比例流动相切换、不同规格色谱柱选择、分离时间设定及馏分收集的自动控制及监测。应用于五味子成分分离的结果表明:采用150mm直径动态轴向压缩色谱柱的VLC,从100g五味子石油醚萃取物中一次分离得到6个组成明显不同的样品(S1~S6)。建立了通过多次薄层色谱(TLC)展开筛选VLC分离条件的方法,并进行了分离验证。VLC分离条件选择方法:自动真空液相色谱的初始洗脱剂的比例以首次TLC展开时全部目标化合物的比移值(Rf)介于0~0. 45时展开剂的组成为宜;梯度洗脱比例变化以k值(展开次数(n)与Rf的线性函数斜率)和TLC分离度为依据选择;不同Rf范围内洗脱次数由n≈ΔRf/k计算。采用选择的条件从样品S5中分离得到了13个组分和4个纯度在85%以上的化合物,仅耗时17h。AUTO-VLC的研制对于中药成分的自动和系统性分离具有重要价值。

关键词: 真空液相色谱 , 自动化装置 , 应用 , 五味子 , 分离

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