张明翠
,
庄惠生
,
郎庆
应用化学
doi:10.3969/j.issn.1000-0518.2006.08.007
通过保留丁酯基结构和在芳环上引入氨基取代基合成了一种邻苯二甲酸二丁酯半抗原衍生物4-氨基邻苯二甲酸二丁酯,通过 1H NMR、IR和UV确证了结构,其中4-硝基邻苯二甲酸二丁酯的2个紫外吸收峰分别为:λ1=212 nm,λ2=258 nm;4-氨基邻苯二甲酸二丁酯的2个紫外吸收峰分别为:λ1=226 nm,λ2=288 nm.半抗原衍生物通过重氮化反应与BSA偶联,得到人工抗原,经荧光光谱(λex=307 nm,λem=468 nm)、体系颜色变化和免疫实验确证偶联成功,抗原结合比为13:1,为进一步的抗体制备和免疫分析提供可靠的免疫原.
关键词:
邻苯二甲酸二丁酯
,
人工抗原
,
半抗原
,
制备
,
表征
张明翠
,
庄惠生
,
郎庆
应用化学
doi:10.3969/j.issn.1000-0518.2007.05.010
邻苯二甲酸二丁酯(DBP)半抗原衍生物通过偶氮键与载体蛋白BSA偶合后作为免疫原,免疫新西兰大白兔,得到合格的DBP抗血清,双向琼脂扩散方法测定血清效价为1:32～1:64,间接荧光免疫法检测效价为1:6 400～1:12 800.通过兔颈部采血、抗血清纯化,得到的抗邻苯二甲酸二丁酯多克隆抗体IgG冻干后,分装在-20 ℃低温保存.建立了间接荧光免疫法检测纯化抗体的方法.间接竞争荧光免疫法考察交叉反应试验结果显示,纯化抗邻苯二甲酸二丁酯抗体与邻苯二甲酸二甲酯、邻苯二甲酸二乙酯、邻苯二甲酸二丙酯、邻苯二甲酸二环己酯、邻苯二甲酸二戊酯、邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯等邻苯二甲酸酯类环境激素的交叉反应均小于10%.制备的抗体可应用于环境激素DBP的荧光免疫分析.
关键词:
邻苯二甲酸二丁酯
,
抗体
,
制备
,
荧光免疫分析
