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毛细管电泳-激光诱导荧光检测分枝杆菌脱氧核糖核酸限制性内切酶谱

黎源倩 , 王国庆 , 米建萍 , 周颖 , 曾红燕 , 张朝武

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2005.01.024

建立了毛细管电泳分离-激光诱导荧光检测(CE-LIFD)分析分枝杆菌脱氧核糖核酸(DNA)限制性内切酶谱的新方法.用聚合酶链反应(PCR)扩增分枝杆菌hsp65基因的长度为439 bp的片段,该扩增片段经限制性内切酶BstEⅡ和HaeⅢ酶切后,分别用CE-LIFD装置和常规琼脂糖电泳(AGE)对比检测酶切片段.对PCR扩增片段的酶切样品的预处理和CE条件进行了优化,获得了8种分枝杆菌DNA的限制性内切酶谱图.DNA片段相对迁移时间的相对标准偏差(RSD)≤3.6%.结果表明,CE的分离效能明显高于AGE,是研究DNA限制性内切酶谱的更有效的检测手段.

关键词: 毛细管电泳 , 激光诱导荧光检测 , 限制性内切酶谱 , 分枝杆菌

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