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毛细管电泳-激光诱导荧光检测分枝杆菌脱氧核糖核酸限制性内切酶谱

黎源倩 , 王国庆 , 米建萍 , 周颖 , 曾红燕 , 张朝武

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2005.01.024

建立了毛细管电泳分离-激光诱导荧光检测(CE-LIFD)分析分枝杆菌脱氧核糖核酸(DNA)限制性内切酶谱的新方法.用聚合酶链反应(PCR)扩增分枝杆菌hsp65基因的长度为439 bp的片段,该扩增片段经限制性内切酶BstEⅡ和HaeⅢ酶切后,分别用CE-LIFD装置和常规琼脂糖电泳(AGE)对比检测酶切片段.对PCR扩增片段的酶切样品的预处理和CE条件进行了优化,获得了8种分枝杆菌DNA的限制性内切酶谱图.DNA片段相对迁移时间的相对标准偏差(RSD)≤3.6%.结果表明,CE的分离效能明显高于AGE,是研究DNA限制性内切酶谱的更有效的检测手段.

关键词: 毛细管电泳 , 激光诱导荧光检测 , 限制性内切酶谱 , 分枝杆菌

毛细管电泳法快速检测消毒剂中的醋酸氯己定

邹晓莉 , 黎源倩 , 毛红霞 , 曾红燕

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2005.03.012

建立了消毒剂中活性成分醋酸氯己定(又名:醋酸洗必泰)的毛细管电泳快速检测法.采用15 mmol/L磷酸盐-乙腈(体积比为60∶40)缓冲体系,将醋酸氯己定在50 cm×75 μm i.d.的石英毛细管柱中进行电泳分离,电泳电压为15 kV,检测波长为254 nm.同时,对毛细管电泳分析醋酸氯己定的条件(如缓冲液的种类、pH值、浓度及电泳电压等)进行了优化.用该方法对消毒剂样品进行测定,在4 min内可完成分析.醋酸氯己定在质量浓度为0.01~0.10 g/L时线性良好,检测限为0.004 mg/L,吸光度值的相对标准偏差为3.97% ,迁移时间的相对标准偏差为2.99% ,样品加标回收率为91.4% ~116.6% .将该方法与高效液相色谱法进行比较,两种方法测定结果的相对误差≤4% .所建立的检测醋酸氯己定含量的毛细管区带电泳法简单、快速,适用于消毒剂样品的测定.

关键词: 毛细管电泳 , 醋酸氯己定 , 消毒剂

反相高效液相色谱法测定人肌腱中的胶原蛋白

邹晓莉 , 黎源倩 , 曾红燕 , 周健 , 秦廷武 , 莫湘涛

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2006.03.012

建立了测定人肌腱中胶原蛋白含量的高效液相色谱法.动物肌腱中的胶原蛋白经酸水解后生成包括羟脯氨酸在内的氨基酸混合物,用2,4-二硝基氯苯对水解产物衍生化,然后以0.01 mol/L乙酸钠-乙酸缓冲液(pH 6.0)-乙腈(体积比为80∶20)为流动相,经反相C18柱分离,紫外检测器于360 nm波长处检测来测定羟脯氨酸的含量.羟脯氨酸是胶原蛋白的特异性氨基酸且含量稳定,因而可通过样品中羟脯氨酸的含量来计算胶原蛋白的含量.该方法对羟脯氨酸的检出限为3 μg/L,羟脯氨酸为3 μg/L~100 mg/L时与峰面积的线性关系良好;样品测定的相对标准偏差为1.95% ,加标回收率为98.4% ~110.8% .对60份人肌腱样品中胶原蛋白的含量进行了测定.所建立的方法灵敏、准确、干扰少,适用于肌腱中胶原蛋白含量的测定.

关键词: 高效液相色谱法 , 羟脯氨酸 , 胶原蛋白 , 肌腱

高效阴离子色谱法测定保健食品中的盐酸氨基葡萄糖

张思维 , 郑波 , 邹晓莉 , 曾红燕 , 孙成均 , 陈鑫

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2009.01.024

建立了保健食品中盐酸氨基葡萄糖的高效阴离子色谱测定方法.在AminoPac PA10离子色谱分离柱(2mm×250 mm)上,以250 mmol/L NaOH溶液作为流动相,利用Au工作电极、pH参比电极的脉冲安培检测器测定了盐酸氨基葡萄糖.方法的线性范围为0.05~10.0 mg/L,检出限为0.012 mg/L,标准品和样品测定的相对标准偏差分别为0.69%和1.38%.用该法测定了保健食品中盐酸氨基葡萄糖,取得了较为满意的结果,加标回收率为96.6%~105.2%,与国家标准方法的测定结果对照,相对偏差为-1.4%~1.0%,表明所建立的方法具有高的灵敏度和精密度,适合于保健食品中盐酸氨基葡萄糖的分析.

关键词: 高效阴离子色谱 , 脉冲安培检测器 , 盐酸氨基葡萄糖 , 保健食品

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