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高效液相色谱-柱前衍生化法测定饲料中的含硫氨基酸

于淑新 , 冯思 , 孙元社 , 唐涛 , 韩晶 , 王丰琳 , 李彤

色谱 doi:10.3724/SP.J.1123.2011.00239

发展了一种饲料中含硫氨基酸的检测方法.样品经过甲酸氧化,特其中的胱氨酸和蛋氨酸分别氧化为磺基丙氨酸和蛋氰酸砜;再经酸水解后,采用2,4-二硝基氟苯进行柱前衍生化,衍生物经高效液相色谱分析.使用EliteAAK C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm)分离;以0.05 mol/L乙酸钠和乙腈-水(50∶50,v/v)为流动相,梯度洗脱,流速为1.2 mL/min;检测波长为360 nm;柱温为31 ℃.结果表明,胱氨酸在0.4~16.0 mg/L、蛋氨酸在0.7~29.6 mg/L范围内的线性相关系数分别为0.999 9、0.999 8;胱氨艘和蛋氨酸的定量限(信噪比(S/N)=10)分别为2.6 μg/kg和3.1 μg/kg;3次样品平行测定的胱氨酸和蛋氨酸含量的相对标准偏差(RSD)分别为0.79%和2.56%,加标回收率分别为100.28%~102.00%和105.72%~107.89%.该方法分析成本低,测定结果准确,灵敏度高,符合倒料中含硫氨基酸的检测要求.

关键词: 高效液相色谱 , 柱前衍牛化 , 2,4-二硝基氟苯 , 胱氨酸 , 蛋氨酸 , 饲料

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