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高效液相色谱法分离和测定小麦中的5种内源激素

张玉琼 , 仲延龙 , 高翠云 , 董召荣 , 陈娜 , 王梅方

色谱 doi:10.3724/SP.J.1123.2013.01011

建立了高效液相色谱法(HPLC)用于分离和测定小麦中的吲哚乙酸(IAA)、脱落酸(ABA)、赤霉素(GA3)、玉米素(ZT)和水杨酸(SA)5种植物内源激素.经过条件优化,选用甲醇作为样品提取溶剂.然后,经石油醚和乙酸乙酯萃取,经Sep-Pak C18小柱纯化.液相色谱的分离采用Eclipse XDB-C18(250 mm ×4.6 mm,5μm)反相色谱柱;流速为1 mL/min;进样量10μL.检测器波长设置为254 nm; 14.5 min时切换到240 nm; SA洗脱后即18min时切换回254 nm.流动相A为甲醇,B为乙酸溶液(pH 3.6).梯度条件为0~7 min,20%A;7~10 min,20%A~ 28%A;10~17 min,28%A;17 ~ 19 min,28% A~40% A; 19 ~35 min,40%A.结果表明,小麦中各激素的分离效果理想,加标回收率达96.9%~ 98%,相对标准偏差在1.54% ~ 2.29%之间.因此,该方法的建立为快速、准确地分离和测定小麦内源激素提供了可靠的方法.

关键词: 高效液相色谱法 , 内源激素 , 小麦

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