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非水毛细管电泳法测定藤黄中藤黄酸的含量

欧婉露 , 李玉娟 , 石冬冬 , 屈锋

色谱 doi:10.3724/SP.J.1123.2014.11006

藤黄酸(gambogic acid,GA)等环氧杂蒽酮类化合物的水溶性差,可通过非水毛细管电泳(non-aqueous capillary electrophoresis,NACE)分析.本文系统地考察了添加20% ~ 60% (v/v)的甲醇或乙腈的运行电解质溶液对藤黄提取液中藤黄酸分离的影响.比较了不同的运行电解质溶液、运行电解质溶液浓度、pH、添加剂β-环糊精的浓度、分离温度及分离电压的影响,建立了测定藤黄药材中藤黄酸含量的非水毛细管电泳方法.在40%乙腈、l0mmol/Lβ-环糊精、20 mmol/L四硼酸钠(pH 9.86)为运行电解质溶液、分离电压为lo kV、分离温度为30℃、检测波长为280 nm的条件下进行测定.结果表明,藤黄酸在2~2000 mg/L范围内线性关系良好,相关系数为0.999 6,检出限(S/N=3)为2 mg/L.将本方法应用于越南、泰国、缅甸、印度4个产地的藤黄药材中藤黄酸的含量测定,测得含量为1.67 ~ 472.40 mg/g(相对标准偏差(RSD)为1.12%~2.60%),其中越南产藤黄中藤黄酸含量低,其他产地藤黄中藤黄酸的含量高.实际藤黄样品中藤黄酸的加标回收率为95.2% ~ 105.6%.非水毛细管电泳方法简单、快速、重现性好,可用于藤黄药材中藤黄酸的含量测定.

关键词: 非水毛细管电泳 , 藤黄酸 , 藤黄

小分子靶标的核酸适配体筛选的研究进展

王勇 , 赵新颖 , 石冬冬 , 杨歌 , 屈锋

色谱 doi:10.3724/SP.J.1123.2015.05001

核酸适配体(aptamer)是通过指数富集配体系统进化(SELEX)技术筛选得到的核糖核酸(RNA)或单链脱氧核糖核酸( ssDNA)。核酸适配体通过高亲和力特异性地识别小分子、蛋白质、细胞、微生物等多种靶标,在生物、医药、食品和环境检测等领域的应用日渐增多。但目前实际可用的核酸适配体有限,其筛选过程复杂,筛选难度大,制约了其应用。与生物大分子、细胞和微生物等靶标不同,小分子靶标与核酸分子的结合位点少、亲和力弱,且靶标通常需要固定在载体上。此外,小分子靶标结合核酸形成的复合物与核酸自身的大小、质量、电荷性质等方面差异较小,二者的分离难度大。故小分子靶标的核酸适配体筛选过程与大分子和细胞等复合靶标相比有明显差异,筛选难度更大。因此需要根据其自身结构特点和核酸适配体的应用目的选定靶标或核酸库的固定方法,优化靶标核酸复合物的分离方法。本文介绍了不同类型小分子(具有基团差异的单分子、含相同基团分子和手性分子等)靶标的选择及其核酸适配体的筛选方法,并对核酸库的设计、与靶标结合的核酸的分离方法和亲和作用表征方法进行了介绍,列出了自2008年以来报道的40余种小分子靶标的核酸适配体序列和复合物的平衡解离常数(Kd)。

关键词: 核酸适配体 , 小分子靶标 , 筛选 , 综述

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