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蛋白质组衍生肽段文库用于鉴定酪蛋白激酶2的底物模体

张曼玉 , 王春丽 , 边阳阳 , 程凯 , 卫晓鸾 , 叶明亮 , 邹汉法

色谱 doi:10.3724/SP.J.1123.2011.00706

模体是蛋白质二级结构上的一种特征序列,激酶底物通常具有一类特征性的模体,识别底物模体对鉴定激酶底物具有重要意义.为了快速鉴定激酶底物模体,将全细胞蛋白质酶解液作为肽段文库的来源,采用碱性磷酸酶去除肽段的固有磷酸化后构建了用于筛选激酶底物模体的肽段文库.该肽段文库是大最非磷酸化肽段的混合物,将此混合肽段与酪蛋白激酶2和 三磷酸腺苷作用30 min后,通过固定化金属离子亲和色谱法富集磷酸化肽段,采用反相液相色谱-串联质谱分析,成功地鉴定到472条非冗余底物肽段,包含451个非冗余磷酸化位点,并山此得到底物模体S/T-D/E-x-D/E.该法能够快速准确地筛选出激酶底物模体,对研究激酶-底物识别以及信号转导过程具有重要意义.

关键词: 固定化金属离子亲和色谱 , 反相液相色谱-串联质谱 , 模体 , 激酶 , 肽段文库 , 蛋白质组学

等离子清洗多层陶瓷外壳的研究

唐娟 , 程凯 , 钟明全 , 张韧 , 施德全

表面技术 doi:10.3969/j.issn.1001-3660.2011.06.029

选用O2作为清洗气体,采用等离子清洗法替代有机溶剂清洗法清洗多层陶瓷外壳,以去除表面的颗粒及有机污染物,研究了清洗过程中功率和时间对Ag72Cu28焊料的影响.结果表明:选用O2作为清洗气体的等离子清洗对Ag72Cu28焊料的影响显著;最佳工艺条件为功率110 W、处理时间200 s.采用最佳工艺对样品进行等离子清洗后再电镀,镀层与基体的结合良好.

关键词: 等离子清洗 , 多层陶瓷外壳 , Ag72Cu28焊料 , 镀层质量 , 结合力

层流与湍流等离子体冲击射流特性比较

王海兴 , 陈熙 , 潘文霞 , 程凯

工程热物理学报

本文采用数值模拟方法,对层流与湍流氩等离子体射流在空气环境中冲击平板时的流动与传热特性进行了对比研究.结果表明,在平板和射流进口间的距离较大时,平板的存在只对其附近的射流参数分布有较大影响,层流等离子体冲击射流的温度与轴向速度的轴向梯度明显小于湍流等离子体冲击射流情形;由于在平板表面形成的径向壁面射流对引射的附加贡献,层流和湍流等离子体冲击射流对环境空气的引射量明显增加.

关键词: 热等离子体 , 层流与湍流等离子体 , 冲击射流 , 数值模拟

屏蔽气体对氩等离子体冲击射流的影响

程凯 , 陈熙 , 潘文霞 , 王海兴

工程热物理学报

在空气环境中利用氩等离子体射流进行材料加工时,环境空气卷吸进入射流可能会引起金属材料氧化.采用同轴屏蔽气体保护是减小该不利影响的一种可行方案.为此本文对空气环境中层流氩等离子体冲击射流特性受屏蔽气体影响问题进行了数值模拟研究,重点考察了屏蔽气体速度等对材料加工区氧含量的影响.

关键词: 氩等离子体 , 冲击射流 , 屏蔽气保护 , 射流卷吸 , 组分扩散

化学镀镍-磷的研究与应用

唐娟 , 程凯 , 张韧 , 钟明全 , 杨晶 , 施德全

电镀与涂饰

化学镀Ni-P因其不受镀覆基材形状的限制、镀层能满足各种不同性能的要求而在各个领域得到了广泛应用.本文介绍了化学镀NiP的反应机理,综述了化学镀Ni-P基合金工艺和化学复合镀Ni-P工艺的研究进展与化学镀Ni-P的应用状况,指出了今后的研究方向.

关键词: 镍-磷合金 , 化学镀 , 复合镀层 , 耐磨性

基于蛋白顺序提取法分析斯达氏油脂酵母的蛋白质组

刘宏伟 , 赵鑫 , 程凯 , 赵宗宝 , 叶明亮

色谱 doi:10.3724/SP.J.1123.2011.00382

斯达氏油脂酵母能在细胞内合成大量的油脂,其细胞内的脂类物质影响着蛋白质提取和后续的蛋白质组学分析.常见的一步蛋白质提取法很难从含有大量油脂的斯达氏酵母细胞中提取蛋白质,因此其蛋白质组学分析的结果较差.本文发展了顺序提取法提取斯达氏酵母中的蛋白质,并采用在线多维微柱反相液相色谱-串联质谱联用技术分析其蛋白质组;共鉴定到227个高可信度的蛋白质,其数目是一步提取法的两倍;此外,所鉴定到的参与基础代谢的蛋白质数目比一步提取法也显著增加.此方法可以有效提取含大量油脂的物种中的蛋白质,为油脂积累的分子机制研究提供重要的信息.

关键词: 在线多维微柱反相液相色谱-串联质谱 , 样品前处理 , 顺序提取 , 蛋白质组分析 , 斯达氏油脂酵母

一种位点注释的蛋白质数据库用于磷酸化肽段的鉴定

程凯 , 王方军 , 边阳阳 , 叶明亮 , 邹汉法

色谱 doi:10.3724/SP.J.1123.2014.10019

磷酸化修饰的分析一直是蛋白质组学研究的热点之一。在鸟枪法的蛋白质组学研究中,通过在数据库检索中设定磷酸化为可变修饰可以直接鉴定磷酸化修饰的位点。但是翻译后修饰的引入会增加数据检索空间,造成鉴定灵敏度的降低。为了解决这一问题,我们构建了一种位点注释的数据库,这种数据库包含蛋白质的磷酸化位点信息,并开发了一种新的数据库检索策略用于磷酸化肽段的可靠鉴定。用不同类型的数据作为分析对象,通过Mascot检索软件对这种新的数据库检索策略进行了考察,证明了这种方法在保证鉴定结果可靠性的前提下提高了磷酸化肽段鉴定的灵敏度。

关键词: 蛋白质组学 , 磷酸化 , 检索空间 , 位点注释

一种耐高温双酚A型2H-苯并吡喃树脂作为复合材料基体的评价

程凯 , 杨光 , 高龙飞

玻璃钢/复合材料

引入红外辐射加热技术,将二炔丙基双酚A醚(BPA单体)在185℃下加热3h,成功制备了双酚A型2H-苯并吡喃(BCA)树脂,并使用该树脂基体制备了玻璃纤维增强复合材料.用差示扫描量热技术(DSC)评价了BCA树脂的固化行为,研究表明其固化放热焓为620J/g.热重分析(TGA)结果表明,BCA树脂具有较好的热稳定性.与环氧树脂基复合材料相比,BCA树脂复合材料力学性能优异,其弯曲强度、弯曲模量及层剪强度分别达到580MPa、24.7GPa和40MPa.另外,动态热机械性能分析(DMTA)结果表明其复合材料具有优良的热性能.

关键词: 2H-苯并吡喃 , 炔丙基 , 复合材料 , 红外加热

溶液燃烧法合成ZnxCo1-xAl2O4尖晶石型超细陶瓷色料

刘欣 , 李家科 , 程凯

人工晶体学报

以Zn(NO3)2·6H2O、Co(NO3)2·6H2O、Al(NO3)3·9H2O和C12H22O11为原料,采用溶液燃烧法合成ZnxCo1-xAl2O4(0≤x≤1)尖晶石型陶瓷色料.采用X射线衍射(XRD)、扫描电子显微镜(SEM)和色度分析仪等检测方法对Zn2+的掺杂量和热处理温度对合成粉体的物相组成、微观形貌和呈色性能的影响规律进行了表征.结果表明:在Zn2掺杂量x=0.2、前驱体溶液中(Zn2++Co2+)浓度为0.3 mol/L、点燃温度400℃、后续热处理温度1200℃和保温时间30 min条件下,合成色料的蓝度值(-b*)达47.03的最大值,其平均晶粒尺寸为120 nm.

关键词: 溶液燃烧 , 尖晶石 , 陶瓷色料 , ZnxCo1-xAl2O4 , 呈色性能

3.5%NaCl溶液中Ni-Co镀层失效过程的EIS研究

解瑞 , 程凯 , 谢新根

腐蚀科学与防护技术 doi:10.11903/1002.6495.2016.014

采用电化学阻抗谱(EIS)技术对电沉积Ni-Co镀层在3.5%NaCl溶液中的腐蚀失效过程进行了研究,发现可采用4种等效电路对镀层的失效过程进行拟合:浸泡初期,镀层耐蚀性能良好,可以简单的等效为镀层电阻与镀层电容的并联;浸泡一段时间后,镀层/金属界面上发生腐蚀反应,引入了双电层电容和界面电荷转移电阻;浸泡后期,界面上的腐蚀产物产生积累,引入反映腐蚀产物信息的Warburg电阻元件;当腐蚀产物的积累影响到腐蚀介质的扩散时,引入了扩散电阻和扩散电容.通过对失效过程中镀层电阻和电容随时间的变化曲线进行分析,发现Ni-Co镀层在3.5%NaCl溶液中的失效过程可分为3个阶段:腐蚀介质的渗透阶段,界面金属的腐蚀阶段和镀层的失效阶段.

关键词: 电化学阻抗谱 , Ni-Co镀层 , 失效过程

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