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新型核壳型亲水聚合物-硅胶杂化填料的合成及其在蛋白质N-糖链富集中的应用

白海红 , 范超 , 沈丙权 , 田芳 , 邓玉林 , 潘一廷 , 秦伟捷 , 钱小红

色谱 doi:10.3724/SP.J.1123.2014.11022

蛋白质的 N-糖基化修饰与多种重要的生理、病理进程密切相关,是多种重大疾病诊断标志物研究的热点。由于糖蛋白本身多是低丰度表达的蛋白质,且糖链结构具有高度微不均一性,这使得蛋白质糖基化修饰的分析具有一定的挑战。本研究利用表面引发-原子转移自由基聚合( SI-ATRP )法,以带有双键的氨基葡萄糖为单体(GMAG),成功制备了新型核壳型亲水聚合物-硅胶杂化填料(pGMAG-SiO2)。由于在硅胶表面引入致密的亲水聚合物层,该填料不仅保持了硅胶良好的机械强度,而且显著提高了其亲水性,因此非常适合作为亲水填料用于蛋白质的N-糖链富集。以麦芽七糖和鸡卵清蛋白的N-糖链为研究对象,考察了该填料对N-糖链的富集效果,并将该杂化填料成功用于人血浆中糖蛋白 N-糖链的富集检测,共鉴定了47种糖型。以上结果表明,pGMAG-SiO2填料对N-糖链具有较高的亲和性,可以用于 N-糖链的高覆盖率鉴定。

关键词: 表面引发-原子转移自由基聚合反应 , 核壳型硅胶填料 , N-糖链 , N-糖基化蛋白质

氧化石墨烯固定化凝集素的制备及在糖蛋白/糖肽富集中的应用

时照梅 , 范超 , 黄俊杰 , 白海红 , 秦伟捷 , 蔡耘 , 钱小红

色谱 doi:10.3724/SP.J.1123.2014.09037

生物体内蛋白质的糖基化修饰调控着细胞识别、细胞黏附和迁移以及免疫应答等多种生理过程,并与多种人类重大疾病的发生、发展密切相关.因此对蛋白质糖基化修饰的鉴定,不仅能够为生物学机理研究提供重要信息,对疾病诊断标志物和治疗靶标的发现也至关重要.然而在复杂生物体系中,大多数糖蛋白为低丰度蛋白质,其含量与现有质谱仪器的检测灵敏度之间存在较大差距,所以对含有不同糖型结构的糖蛋白进行全面/高效的富集,是实现高灵敏度糖蛋白鉴定的必由之路.凝集素富集作为一种有效的糖蛋白富集方法,已在糖蛋白质组学研究中得到了广泛的应用.针对现有凝集素功能化材料存在负载量偏低以及富集效率有限等问题,我们制备了两种以氧化石墨烯(GO)为载体的新型固定化凝集素,利用GO比表面积大,功能基团含量高,分散性、化学稳定性好等特点,实现了高负载量的凝集素固定(GO-ConA 2.073 mg/mg,RSD=1.0%;GO-WGA 1.908 mg/mg,RSD=0.14%).同时考察了材料的可重复使用性与稳定性:每隔3天测一次同一GO-lectin材料对对应糖蛋白的富集效果,可以看出材料合成两周内富集效果都>200 μg/mg.将该GO-lectin成功应用于糖蛋白、糖肽的选择性富集,在糖蛋白质组学研究中体现出良好的应用潜力.

关键词: 凝集素 , 氧化石墨烯 , 富集 , 糖蛋白 , 糖肽

富铈混合稀土对再生铝硅合金组织和性能的影响

范超 , 龙思远 , 吴明放 , 杨怀德

稀有金属材料与工程

采用光学显微镜(OM)、扫描电镜(SEM)、能谱仪(EDX)和差分扫描量热仪(DSC)等手段研究了富铈混合稀土对再生铝硅合金显微组织和力学性能的影响.结果表明:富铈混合稀土能够明显细化合金晶粒,能将粗大的汉字状α-Fe变质为细小的形状,还生成了新的富稀土相.当富铈混合稀土添加量1%(质量分数)时,综合力学性能最佳.

关键词: 富铈混合稀土 , 再生铝硅合金 , 组织 , 性能

ZnO压电薄膜的制备与性能表征

许恒星 , 王金良 , 唐宁 , 彭洪勇 , 范超

人工晶体学报

采用射频磁控溅射法在硅(100)衬底上制备高质量的ZnO压电薄膜.利用X射线衍射仪(XRD)、原子力显微镜(AFM)、压电响应力显微镜(PFM)等仪器研究了薄膜成分,表面形貌和压电性质.结果表明:实验制备的ZnO薄膜具有很好的压电性质,c轴取向和表面粗糙度对薄膜压电特性有很大影响,高度c轴取向生长和表面粗糙度较小的ZnO薄膜表现出更好的压电性质.

关键词: ZnO薄膜 , 射频磁控溅射 , 压电性质 , 表面粗糙度

废铝旋转喷吹除氢的水模拟试验与熔炼实验验证

李聪 , 龙思远 , 杨怀德 , 范超 , 逯志浩

兵器材料科学与工程

为探索废铝熔体旋转喷吹除氢的优化工艺组合,从氢的来源入手,以相似原理为指导,进行旋转喷吹的水模拟试验,然后以水模拟试验结果为参考,进行废铝的熔炼除氢实验,并分析其除氢效果.结果表明:转子偏置分布实验中,氢的质量浓度从0.30 mL/100 g降至0.11 mL/100 g,效果明显优于转子中心分布实验,从而验证水模拟试验的优化工艺组合的准确性.

关键词: 废铝 , , 水模拟 , 旋转喷吹 , 偏置

Mn和Ce对再生Al-Si合金富铁相的影响

范超 , 龙思远 , 杨怀德 , 王向杰 , 张均成

稀有金属材料与工程

研究了Mn、Ce对再生Al-Si合金富铁相的影响.分别采用光学显微镜(OM)、扫描电镜(SEM)和能谱仪(EDX)对试样组织进行形貌观察分析和生成相进行成分分析,利用差分扫描量热仪(DSC)研究相转变温度.结果表明,当Mn的含量为1%(质量分数)时,合金组织出现了初生α-Fe相,同时添加0.1%Ce(质量分数)时,能够有效促进初生α-Fe相形核与长大.

关键词: Ce , 富铁相 , 再生Al-Si合金

硼化物、锰去除再生Al-Si合金中铁元素机理研究

杨怀德 , 龙思远 , 吴明放 , 范超 , 吴星宇

稀有金属

研究了KBF4和KBF4、Mn对再生A1-Si合金中的富铁相变质行为的影响以及采用沉降法进行除铁探索.应用光学显微镜(OM)、扫描电镜(SEM)对试样组织进行形貌观察,采用X射线衍射仪分析仪(XRD)、X射线荧光光谱分析仪(XRF)对试样进行相分析和成分分析,利用差分扫描量热仪(DSC)研究相转变温度.研究表明,硼化物(KBF4)能促使再生Al-Si合金析出初生α-Fe相;Mn元素能促使初生α-Fe相长大,初生α-Fe相会沉淀到炉底.加硼化物(KBF4)、Mn的再生Al-Si熔体随炉冷却形成的铝锭,铁含量随着离铝锭顶端的距离增加而增加,铝锭中上部铁含量低于原始量.

关键词: 富铁相 , 变质 , 再生Al-Si合金 , 除铁 , 硼化物

新型亲水聚合物修饰硅胶颗粒固定化酶的制备及在蛋白质组鉴定中的应用

范超 , 宋子凤 , 秦伟捷 , 蔡耘 , 钱小红

色谱 doi:10.3724/SP.J.1123.2013.01007

采用原子转移自由基聚合法制备了亲水聚合物修饰的硅胶颗粒作为一种新型固定化酶载体,在实现胰蛋白酶高密度固定的同时,显著降低了载体材料非特异性吸附导致的样品损失.因此,该固定化酶材料兼具高酶解效率和高回收率的特性.以标准蛋白质牛血清白蛋白(BSA)为样本,使用该固定化酶1 mm即可完成酶解,鉴定到肽段对BSA的氨基酸序列覆盖率可达90%以上.该固定化酶材料成功应用于酵母菌全蛋白质复杂样本的酶解,从3 min酶解产物中鉴定到666个蛋白质,超过同样条件下溶液酶解12 h的鉴定结果.

关键词: 固定化酶 , 蛋白质组学 , 原子转移自由基聚合反应

硼化物、富Ce混合稀土对再生Al-Si合金中富铁相变质行为的影响

杨怀德 , 龙思远 , 朱姝晴 , 范超 , 杨承志

稀有金属

研究了硼化物、富Ce混合稀土对再生Al-Si合金富铁相变质行为的影响.采用光学显微镜(OM)、扫描电镜(SEM)对试样微观组织进行形貌观察,采用x射线衍射分析仪(XRD)、扫描电镜附带的能谱仪(EDS)分别对试样进行相分析与成分分析,利用差分扫描量热仪(DSC)研究相转变温度.研究表明,硼化物可以促进针状β-Fe相向初生α-Fe相转变,且初生α-Fe相尺寸随着硼化物的添加量增加而增大.当硼化物(KBF4)添加量达到1.0%时(质量分数),开始析出汉字状α-Fe相,汉字状α-Fe相以初生α-Fe相为基底形核并长大;富Ce混合稀土不仅可以抑制初生α-Fe相长大,且能抑制汉字状α-Fe相生成.

关键词: 富铁相 , 变质 , 再生Al-Si合金 , 稀土 , 硼化物

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