王琴琴
,
郁蕙蕾
,
赵娜
,
李春秀
,
尚亚卓
,
刘洪来
,
许建和
催化学报
doi:10.1016/S1872-2067(11)60333-1
使用酶法合成了一系列不同烷基链长的β-D-烷基葡萄糖苷.结果表明,除甲基糖苷外,烷基碳链越长,反应初速度越低,糖苷的最终收率越低.从热力学角度系统地研究了这些糖苷合成的平衡常数和吉布斯自由能变化.通过改变反应的平衡,提高了长链烷基糖苷的最终收率.当水含量从10％降至5％ (v/v),使用叔丁醇作为共溶剂,添加0.1 mol/L葡萄糖作为底物时,癸基糖苷的平衡得率从1.9％提高至6.1％.除了其他长链的烷基糖苷外,庚基糖苷也显示了明显的表面活性剂活性.
关键词:
β-D-烷基葡萄糖苷
,
癸基-D-葡萄糖苷
,
酶催化
,
逆水解
,
微水环境
,
平衡收率
赵玉巧
,
许建和
催化学报
考察了反应条件对不动杆菌Acinetobacter sp. YQ231催化外消旋环戊酮醇乙酸酯对映选择性水解的反应速度和对映选择性的影响. 确定的最佳酶反应条件为pH 8.0,温度50 ℃. 不同乳化剂对对映选择性的影响不同, 以壬基酚聚氧乙烯醚的效果最好,当其加入量为15 g/L 时,反应的对映选择性最高. 产物环戊酮醇对酶活性有显著的抑制作用. 细胞中的酯酶优先水解(R)-环戊酮醇乙酸酯,生成(R)-环戊酮醇,在底物浓度为250 mmol/L时,对映体比率(E值)可达50.
关键词:
环戊酮醇乙酸酯
,
对映选择性水解
,
环戊酮醇
,
酶促拆分
,
微生物酯酶
,
不动杆菌
罗涤衡
,
宗敏华
,
陈晓瑜
,
袁玉宇
,
许建和
催化学报
尽管含芳香基等较大取代基团的底物能被生物转化为高对映体纯手性有机硅醇,但生物催化其他底物还原反应的产物收率及对映体选择性均较低. 作者筛选到一株能高效催化羰基/羟基不对称转化的酵母菌株,探讨了用固定化酵母细胞高效催化乙酰基三甲基硅烷不对称还原制1-三甲基硅乙醇的可能性,系统研究了培养基碳源及其浓度对该反应的影响. 发现在水/正己烷两相体系中,固定化酵母细胞能催化乙酰基三甲基硅烷不对称还原成1-三甲基硅乙醇. 可通过调节培养基碳源的种类及其浓度在一定程度上控制反应的产物收率及对映体选择性. 以最适碳源(3.0%麦芽汁)培养的酵母细胞催化该反应的产物收率和对映体过量值分别为91.3%和72.8%,远高于文献报道值.
关键词:
Rhodotorula sp.AS2.2241,培养基,碳源,乙酰基三甲基硅烷,不对称还原,三甲基硅乙醇
赵晶
,
鞠鑫
,
潘江
,
李春秀
,
王敏杰
,
许建和
催化学报
doi:10.3724/SP.J.1088.2012.10832
对已公布的全基因组进行检索发现,杨树(Populus tomentosa)至少含有24个预测为可溶性环氧水解酶的基因.从中选取了7个可能的环氧水解酶基因进行克隆,通过扩增得到其中5个毛白杨(Populus tomentosa Carr)环氧水解酶基因.序列分析显示,它们与已克隆的巨大芽胞杆菌环氧水解酶的同源性仅为24％～26％.对该系列基因进行了在E.coli中的异源表达,并将得到的5个环氧水解酶(PTEH 1～5)用于缩水甘油苯基醚和对硝基苯乙烯氧化物的酶促水解反应.结果发现,其中3个重组酶具有显著的环氧水解酶活性.进一步研究表明,PTEH1和PTEH2对于缩水甘油苯基醚显示了一定的反常规的(R)-选择性,而PTEH5则优先水解(S)-构型的缩水甘油苯基醚.因此,毛白杨中环氧水解酶表现出多样性.
关键词:
毛白杨
,
环氧水解酶
,
异源表达
,
缩水甘油苯基醚
,
对硝基苯乙烯氧化物
,
催化拆分
董青
,
欧阳立明
,
刘建文
,
许建和
催化学报
doi:10.1016/S1872-2067(10)60116-7
建立了以麦芽糊精和磷酸盐为底物,在常温下合成α-D-葡萄糖-1-磷酸的生物催化体系.从大肠杆菌K12中克隆表达了麦芽糊精磷酸化酶,并固定化在氨基修饰的磁性纳米颗粒上,以便于酶的回收和重复利用.在优化的反应条件下,于200ml体系中连续使用该固定化酶8批次,催化合成了α-D-葡萄糖-1-磷酸.经过简单的纯化步骤,最终得到440mg产品,分离产率为70.5%.
关键词:
α-D-葡萄糖-1-磷酸
,
麦芽糊精磷酸化酶
,
麦芽糊精
,
磁性纳米颗粒
,
固定化生物催化剂
王净
,
田晶
,
许建和
催化学报
以对甲基苯甲酸为唯一碳源筛选能够生物催化合成对苯二甲酸的菌株,发现只有睾丸酮丛毛单胞菌DSM6577可以氧化对甲基苯甲酸生成对苯二甲酸. 对该菌株的细胞生长及其催化对甲基苯甲酸转化为对苯二甲酸的过程进行了研究. 结果表明,底物在8 h内即可完全转化,产物的生成时间为14～31 h, 其中在21 h时产量最大,为34 mg/L.
关键词:
睾丸酮丛毛单胞菌
,
生物催化
,
对甲基苯甲酸
,
对苯二甲酸
刘湘
,
方志杰
,
许建和
催化学报
研究了酵母细胞催化芳香酮的不对称还原反应,采用正交试验综合考察了反应温度、反应时间、底物浓度和酵母浓度等因素对底物苯乙酮转化率和产物(S)-1-苯基乙醇对映选择性的影响. 结果表明,影响苯乙酮转化率的因素依次为底物浓度、反应时间、反应温度和酵母浓度,影响(S)-1-苯基乙醇对映选择性的因素依次为反应温度、底物浓度、酵母浓度和反应时间. 同时考察了芳香酮结构对产物对映选择性的影响,发现对映选择性的变化规律符合Prelog规则,与羰基相连的两个基团体积差异越大,对映选择性越好,最高的对映体过量值达到了96.4%.
关键词:
面包酵母
,
全细胞生物催化
,
芳香酮
,
不对称还原
,
苯乙酮
,
(S)-1-苯基乙醇
,
正交试验
张仙
,
潘江
,
许建和
催化学报
以γ-丁内酯系列化合物作为唯一碳源,通过富集培养从土壤中分离得到180株产内酯酶的菌株.经反复筛选,从中挑选出两株内酯水解活性和选择性均较高的菌株.经鉴定,这两株真菌皆为镰孢霉菌属,分别命名为Fusarium moniliformeECU2001和Fusarium prollyeratum ECU2002.对这两株菌的产酶特性进行了研究,发现ECU2001的内酯酶属于胞内酶,而ECU2002的内酯酶同时存在于胞内和胞外.选择戊二醛交联的方法对这两株菌进行了细胞固定化,结果表明,ECU2002固定化细胞的活力、选择性和稳定性都优于ECU2001.ECU2002固定化细胞反应的适宜温度和pH分别为50℃和7.0～7.5.考察了ECU2002固定化细胞的底物专一性,发现底物为α-羟基-γ-丁内酯时,固定化细胞的活性最高,其催化速率是γ-丁内酯的54.3倍.利用ECU2002固定化细胞催化α-羟基-γ-丁内酯的对映选择性水解,固定化细胞重复使用10批后活力仍保持为初始活力的92.8%,水解产物经内酯化后得到(R)-α-羟基-γ-丁内酯的光学纯度为92.8%～96.1%ee.
关键词:
内酯酶
,
串珠镰孢菌ECU2001
,
层出镰孢菌ECU2002
,
固定化细胞
,
α-羟基-γ-丁内酯
