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分离尿激酶的亲和色谱填料的制备

高俊萍 , 梁峰 , 常建华 , 郭立安 , 苏天升

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2000.02.021

合成了分别以Sepharose和聚甲基丙烯酸环氧丙酯为基质、对氨基苯甲脒为配基的分离尿激酶的两种亲和色谱填料,并用于尿激酶粗品的直接纯化,活性回收率分别为108.3%和43.4%,比活提高倍数分别为9.06倍和36.9倍.

关键词: 亲和色谱 , 填料 , 尿激酶

促卵泡激素的径向色谱纯化工艺

郭立安 , 阎哲 , 杨晓东 , 褚西秦 , 徐海峰

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2000.06.028

比较了径向离子交换色谱与经典离子交换色谱在纯化工艺放大过程中的分离效果,证实了径向色谱比经典色谱更适合于促卵泡激素(FSH)的纯化,并建立了适合于大规模生产FSH的径向色谱纯化新工艺.纯化后FSH的比活性为180IU/mg,活性回收率为56%,产品质量符合国家药典规定.

关键词: 径向色谱 , 离子交换色谱 , 促卵泡激素 , 纯化

新型磁性葡聚糖亲和吸附剂的制备及在尿激酶纯化中的应用

董聿生 , 梁峰 , 余向阳 , 郭立安 , 常建华

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2001.01.006

采用反相悬浮包埋技术合成多分散的粒径在50目～300目的磁性葡聚糖微球（MDMS）。MDMS经环氧氯丙烷活化后，分别键合氨基乙酸、6-氨基己酸和乙二胺作为间隔臂，以碳二亚胺为偶联剂，分别偶联L-精氨酸甲酯、对氨基苯甲脒和胍基己酸配体，制备了5种磁性亲和吸附剂。研究了分散介质及其粘度和密度、有机相和水相的体积比、表面活性剂的用量、搅拌速度等因素对微球制备的影响。将所制备的磁性亲和吸附剂应用于尿激酶粗品的纯化，并讨论了偶联试剂和配体对尿激酶纯化效果的影响。通过测定，尿激酶的活性回收率为40.0%～60.7%、纯化倍数为14.9～32.8、吸附容量为89mg/L～121mg/L。

关键词: 葡聚糖 , 磁性亲和吸附剂 , 制备 , 尿激酶 , 纯化

疏水作用色谱法同时纯化及复性基因重组人干扰素- α

郭立安

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2001.04.004

使用高效疏水作用色谱直接从大肠杆菌表达的基因重组人干扰素-α（rhIFN-α）包涵体的裂解液中纯化了rhIFN-α，并在纯化的同时获得了高的复性效率，使复性和纯化一步完成，大大地简化了操作步骤。用凝胶排阻色谱对该法纯化的rhIFN-α进行了纯度测定，纯度达到95％以上。该法的活性回收率分别比稀释法和透析法高1.0倍和1.6倍。

关键词: 高效液相色谱 , 干扰素-α , 纯化 , 复性 , 重组蛋白质

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