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胰蛋白酶水解全酪蛋白反应过程中的色谱分析

齐崴 , 何明霞 , 何志敏 , 史德青

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2002.01.001

将高效凝胶排阻色谱(HPSEC)技术与水解度(DH)概念相结合,对酪蛋白-胰蛋白酶水解体系的酶解反应过程进行色谱分析,得到定量表征复杂酶解反应进程和不同DH值时多样性酶解产物相对分子质量分布的二维图线;依据蛋白质结构信息,结合HPSEC实验谱图,对胰蛋白酶作用于酪蛋白时的酶解断裂位点进行剖析,初步推断反应历程,并得到理论酶解肽段的相对分子质量分布图及酶解物中活性多肽酪蛋白磷酸肽(CPPs)肽谱.

关键词: 酪蛋白 , 胰蛋白酶 , 酶促水解 , 水解度 , 高效凝胶排阻色谱 , 酪蛋白磷酸肽 , 肽谱

酪蛋白酶解反应复杂产物的色谱定量分析

于艳军 , 齐崴 , 何志敏

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2005.02.015

根据酪蛋白酶解产物的高效凝胶排阻色谱(HPSEC)定性分析结果,选取不同截留相对分子质量的超滤膜对酶解产物进行截分,制得3种相对分子质量分布相对集中的区间组分;建立各组分峰面积与质量浓度之间的线性关系,由此定量计算不同反应时间的酶解产物中相应相对分子质量区间组分的质量浓度.研究表明,将膜分离方法与色谱分析相结合可实现对蛋白质、多肽等复杂体系相对精确的定量分析.

关键词: 酪蛋白 , 酶促水解 , 高效凝胶排阻色谱 , 复杂体系 , 膜分离 , 定量分析

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