杨瑜静
,
谷雪莲
,
徐秀林
,
朱根娣
,
王新华
膜科学与技术
doi:10.3969/j.issn.1007-8924.2008.06.016
以Fresenius F6聚砜膜复用透析器为研究对象,对其膜表面粘附的蛋白进行定量分析研究.用4种不同的化学清洗剂及超声波的方法,对膜表面粘附的蛋白进行清洗,以获得最佳清洗方法;对透析器不同部位膜上的蛋白进行测定,获得不同部位膜上蛋白含量的差异性;用双向电泳的方法检测膜上粘附的蛋白含量及其性质,获得不同种类蛋白与聚砜膜结合的特异性关系.结果显示:使用5次后每克纤维膜表面粘附的蛋白量至少为0.1 mg,且在透析器各部位分布不同;超声波是一种用来清洗膜上残留物质的有效方法;膜表面粘附的蛋白主要是中性或偏酸性的蛋白,中、大分子量的蛋白容易造成膜孔堵塞且不易去除,而小分子量的蛋白较易去除.
关键词:
复用透析器
,
粘附蛋白
,
超声波
,
双向电泳
那宏坤
,
黄清育
,
陈盈盈
,
黄河清
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2008.06.003
以甲基对硫磷(MP)为有机磷农药污染源,采用蛋白质组学技术分离及鉴定在甲基对硫磷胁迫下,牙鲆(Paralichthys olivaceus)脑组织表达的差异蛋白质,从中筛选出潜在的适合于监测甲基对硫磷污染程度的蛋白指示物.实验结果表明:在甲基对硫磷胁迫下,牙鲆脑组织表达出17个差异蛋白质,经肽质量指纹(PMF)图谱技术鉴定后,发现其中部分差异蛋白质为热休克蛋白、细胞色素P450和谷胱甘肽S-转移酶,均是与受甲基对硫磷胁迫有关的蛋白质.
关键词:
蛋白质组学
,
双向电泳
,
甲基对硫磷
,
蛋白指示物
,
牙鲆脑
曾广娟
,
李春敏
,
张新忠
,
滕云龙
,
董文轩
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2009.04.021
为了探索适用于双向电泳(2-DE)分析的苹果叶片蛋白质提取方法,比较了三氯乙酸(TCA)/丙酮沉淀法、二硫苏糖醇(DTT)/丙酮法、Tris-HCl提取法和改良的Tris-HCl提取法等4种蛋白质提取方法.以7 cm、pH 3～10的线性固相pH梯度(immobilized pH gradient,IPG)胶条作为第一向电泳,以十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)(12.5%的分离胶)作为第二向电泳,对提取物进行2-DE分离,采用银染显色.结果表明,上述4种方法在2-DE图谱上分别得到140,215,181和616个蛋白质点.其中以改良的Tris-HCl提取法得到的蛋白质点数最多,且背景清晰、图谱上没有明显的横纵条纹.为了进一步验证改良的Tris-HCl提取法的有效性,用18 cm、pH 3～10的线性IPG胶条和12.5%的分离胶对提取的苹果叶片蛋白质进行2-DE分离,考马斯亮蓝R-250染色,共检测到455个蛋白质点,其相对分子质量主要分布在 14 000～66 000 范围内,图谱背景清晰,再次证明应用该方法制备的样品适用于双向电泳分析,可用于苹果叶片的蛋白质组学分析.
关键词:
双向电泳
,
蛋白质提取方法
,
苹果叶片
,
蛋白质组学分析
