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谷胱甘肽过氧化物酶模拟物2-位碲桥联环糊精的合成及催化作用

张鲲 , 任晓君 , 牟颖 , 薛雁 , 郭灿辉 , 阎岗林 , 罗贵民 , 沈家骢

催化学报

以β-环糊精(CD)为酶模型,将Te引入β-环糊精中,成功地合成出一种新的水溶性好、活力高的谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)小分子模拟物2-TeCD,并对其结构进行了表征. 采用Wilson辅酶偶联法,间接测定了2-TeCD催化还原型谷胱甘肽(GSH)还原H2O2的GPX活力为46.7 U/μmol,与文献报道的数据相比,2-TeCD的GPX活力最高. 通过考察2-TeCD催化GSH还原H2O2反应的动力学,发现反应初速度对底物浓度的双倒数曲线为一组平行线,表明2-TeCD所遵循的催化机制可能为三转移乒乓机制. 通过考察自由基捕获剂2,4-二叔丁基甲基苯酚对酶促和自发反应速率的影响,发现2-TeCD催化的酶促反应为非自由基机理. 通过考察酶不可逆抑制剂碘乙酸对酶促反应速率的影响,发现2-TeCD催化反应过程中不生成碲醇中间体. 由此推测出2-TeCD的催化循环经历碲硫化合物、次碲酸硫酯和次碲酸中间体. 该催化循环与含硒GPX小分子模拟物所经历的催化循环不同,以及环糊精对底物具有识别与结合的能力,可能是2-TeCD具有高GPX活力的主要原因.

关键词: β-环糊精 , 谷胱甘肽过氧化物酶 , , 人工酶

谷胱甘肽过氧化物酶模拟物碲化透明质酸的合成及催化动力学研究

张博旬 , 陈智博 , 安洋 , 彭清林 , 陈佳 , 张建国 , 刘兰英

催化学报

以透明质酸(HA)作为谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)的酶模型,将碲(Te)引入HA中,合成了一种新型的高活力的GPX模拟物--碲化透明质酸(TeHA).用红外光谱和核磁共振技术对TeHA的结构进行了研究,证明Te的修饰位点位于HA的N-乙酰氨基葡萄糖的羟甲基(-CH2OH)上.采用Wilson辅酶偶联法测定得到TeHA催化还原型谷胱甘肽(GSH)还原H2O2的GPX活力为163.6 U/μmol,高于文献报道的其它模拟酶.TeHA还能够催化GSH还原异丙苯基过氧化物(CuOOH)和叔丁基过氧化物(t-BuOOH)的反应,并且CuOOH为该模拟酶的最适底物.通过研究TeHA催化GSH还原三种不同过氧化物的反应动力学发现,TeHA的催化遵循乒乓机制.

关键词: 透明质酸 , , 谷胱甘肽过氧化物酶 , 动力学

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