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胰蛋白酶水解全酪蛋白反应过程中的色谱分析

齐崴 , 何明霞 , 何志敏 , 史德青

色谱 doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2002.01.001

将高效凝胶排阻色谱(HPSEC)技术与水解度(DH)概念相结合,对酪蛋白-胰蛋白酶水解体系的酶解反应过程进行色谱分析,得到定量表征复杂酶解反应进程和不同DH值时多样性酶解产物相对分子质量分布的二维图线;依据蛋白质结构信息,结合HPSEC实验谱图,对胰蛋白酶作用于酪蛋白时的酶解断裂位点进行剖析,初步推断反应历程,并得到理论酶解肽段的相对分子质量分布图及酶解物中活性多肽酪蛋白磷酸肽(CPPs)肽谱.

关键词: 酪蛋白 , 胰蛋白酶 , 酶促水解 , 水解度 , 高效凝胶排阻色谱 , 酪蛋白磷酸肽 , 肽谱

利用高效液相色谱-串联质谱追踪酸奶发酵过程中的酪蛋白磷酸肽

董浩 , 于洋 , 晏嘉泽 , 靳艳

色谱 doi:10.3724/SP.J.1123.2017.03012

酪蛋白磷酸肽(CPPs)是酪蛋白被磷酸化的片段,具有促进矿物元素吸收、抗氧化、预防龋齿等多种生物功能.该文利用高效液相色谱-串联质谱研究牛奶经嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)和保加利亚乳杆菌(Lactobacillus debrueckii subsp.bulgaricus)发酵后CPPs的释放规律.结果表明,在内源性蛋白酶的作用下牛奶含内源性CPPs,内源性CPPs主要来源于高丰度酪蛋白αs1-CN和β-CN.经乳酸菌发酵后,在乳酸菌蛋白酶的作用下更多酪蛋白的磷酸化位点暴露而产生大量CPPs,其中含SpSpSpEE特征结构的CPPs也在酸奶中检测到,CPPs的释放与酪蛋白结构密切相关.研究结果表明,牛奶经乳酸菌发酵后释放大量含特征结构SpSpSpEE的CPPs,可提高结合矿物元素的能力,从而增强其促进人体健康的生物功能.

关键词: 高效液相色谱-串联质谱 , 酪蛋白磷酸肽 , 乳酸菌 , 酸奶

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