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Activities of Key Enzymes in the Biosynthesis of Poly-3-Hydroxybutyrate by Methylosinus trichosporium IMV3011

宋昊 , 张颖鑫 , 孔维宝 , 夏春谷

催化学报 doi:10.1016/S1872-2067(11)60443-9

The activities of the key enzymes involved in the intracellular poly-3-hydroxybutyrate (PHB) synthesis of Methylosinus trichosporium IMV3011 were studied under various cultivation conditions. The enzymes were methane monooxygenase (MMO),β-ketothiolase, acetoacetyl-CoA reductase, PHB synthetase, and PHB depolymerase. Each enzyme had a unique catalytic mechanism. MMO activity decreased continuously with PHB production, but PHB at a high concentration was beneficial for maintaining MMO activity because more NADH was released by PHB depolymerization. The important reaction for entering the PHB cycle was catalyzed byβ-ketothiolase. The monomer of β-hydroxybutyrate was synthesized by the catalysis of β-ketothiolase and acetoacetyl-CoA reductase. PHB synthetase played an important role in the PHB synthesis routes. The activity of PHB synthetase increased with PHB production. The changes of en-zyme activities involved in PHB synthetase and PHB depolymerase occurred together, which indicated that the polymerization and depoly-merization of intracellular PHB occurred simultaneously. The molecular weight of PHB was determined mainly by the combined actions of PHB synthetase and PHB depolymerase. Some important intermediates in the tricarboxylic acid cycle were helpful for PHB production be-cause they increased related enzyme activities in the PHB cycle.

关键词: enzyme activity , biocatalysis , poly-3-hydroxybutyrate , methanotrophic bacteria

担载不同结构胺基的P(GMA-EDGMA)大孔载体的固定化酶活

厉向杰 , 张宝亮 , 贾佳 , 张秋禹

高分子材料科学与工程

设计并制备了一种树枝状超支化胺(DHA-NH2),并用红外光谱(IR)、核磁共振谱(NMR)对其结构和性能进行了研究.利用DHA-NH2、乙二胺、己二胺、二乙烯三胺分别修饰P(GMA-EDGMA)树脂,制备得到4种表面带有不同胺基结构的固定化酶载体,以木瓜蛋白酶为被固定酶模型,研究表面胺基结构与固定化酶活之间的构效关系.结果表明,在胺基含量基本相同的条件下,载体固定化酶活顺序为二乙烯三胺>己二胺>乙二胺> DHA-NH2;活性链段数目、活性链段官能团密度以及活性链段长度共同决定固定化酶的酶活,且增加活性链段数目、增大活性链段官能团密度以及增长活性链段长度均能在一定程度上提高固定化酶活.

关键词: 胺基修饰 , 大孔树脂 , 固定化酶 , 木瓜蛋白酶 , 酶活性

大孔树脂固定木瓜蛋白酶的研究

贾佳 , 尹德忠 , 张宝亮 , 张和鹏 , 张昊天 , 厉向杰

材料导报

以环氧和氨基化的大孔树脂为载体,戊二醛为交联剂对木瓜蛋白酶进行了固定化,研究了不同载体和固定化条件对酶固定化率和相对活性的影响,考察了不同温度和pH值下游离酶和固定化酶的稳定性.实验结果表明,当给酶量为40 mg,固定化温度为77℃,固定化时间为12 h,pH值为6.5时,固定化酶的活性最高.与游离酶相比,固定化酶有更好的温度和pH值稳定性.

关键词: 大孔树脂 , 木瓜蛋白酶 , 固定化 , 酶活

施用磷肥对南方酸性红壤镉生物有效性及 土壤酶活性影响

王朋超 , 孙约兵 , 徐应明 , 秦旭 , 赵立杰 , 王林

环境化学 doi:10.7524/j.issn.0254-6108.2016.01.2015071704

采用盆栽试验,研究了普钙和钙镁磷肥对油菜生物量和Cd含量、土壤pH值和Cd有效态含量以及土壤酶活性的影响.结果表明,施加普钙和钙镁磷肥后,油菜生物量分别比对照处理增加41. 8%—60. 5%和90.2%—171.6%,油菜地上部Cd含量分别降低达54.3%—86.7%和74.4%—79.6%,其中当普钙和钙镁磷肥施加量为中高剂量时,油菜地上部Cd含量降低至0.18 mg·kg-1和0.10 mg·kg-1 ,符合国家食品安全标准《食品中污染物限量》( GB 2762—2012)规定的叶菜蔬菜中Cd的最大限量值.施加普钙和钙镁磷肥均降低了土壤中Cd有效态,与对照相比,土壤中HCl提取态Cd含量分别降低0.9%—21.2%和33.8%—43.9%,CMP处理下TCLP (Toxicity characteristic leaching procedure, TCLP)提取态Cd含量降低33.0%—43.0%.施加高剂量普钙和中剂量钙镁磷肥时,土壤过氧化氢酶活性与对照相比分别增加了202.5%和52.6%,施加不同剂量的普钙均显著降低土壤脲酶活性,降低率达28.2%—65.9%,而添加普钙和钙镁磷肥对蔗糖酶活性均无显著性影响.土壤pH与油菜生物量以及土壤脲酶成极显著正相关关系,与TCLP-Cd成显著负相关关系.油菜生物量与土壤有效态Cd含量和油菜体内Cd含量存在负相关关系,其中与HCl提取态Cd及地上部Cd含量存在显著负相关关系.

关键词: 磷肥 , 红壤 , 油菜 , , 生物有效性 , 酶活性

低温反硝化过程中pH对亚硝酸盐积累的影响

李思倩 , 路立 , 王芬 , 杜晓娜 , 季民

环境化学 doi:10.7524/j.issn.0254-6108.2016.08.2016011105

以乙酸钠为单一碳源,在C/N比为3、温度为12-14℃的低C/N比、低温条件下通过间歇试验研究pH对反硝化亚硝酸盐积累规律影响.试验结果发现,在C/N为3时,pH值在7-9的范围内都能形成亚硝酸盐积累.反应时间为60 min时,亚硝酸盐积累率最大可达50%左右,低温SBR反应器连续试验研究表明,pH值为7.4±0.1和pH值为8.4+0.1时,序批式活性污泥法(SBR)出水亚硝酸盐积累率分别为51%和48%,取pH值为7.4±0.1条件下SBR反应器活性污泥进行酶活力测定发现,硝酸盐还原酶活力是亚硝酸盐还原酶活力的1.2倍,硝酸盐还原酶活力与亚硝酸盐还原酶活力对外界条件变化敏感程度不同,亚硝酸盐还原酶对外界条件变化更为敏感,其受到的抑制作用要大于硝酸盐还原酶,进而造成NO2-N的积累.

关键词: 反硝化 , 亚硝酸盐积累 , pH , 酶活力

六溴环十二烷对土壤酶活性、种子发芽率及根伸长的影响

周耀红 , 马晓净 , 吕辉雄

环境化学 doi:10.7524/j.issn.0254-6108.2017.01.2016052405

以水稻土配制不同浓度(0.2%、0.5%和1%)的六溴环十二烷污染土壤,采用容量法和磷酸苯二钠比色法测定土壤中过氧化氢酶和磷酸酶的活性,研究六溴环十二烷对土壤酶活性(过氧化氢酶、磷酸酶)的影响,并通过配制不同浓度梯度的六溴环十二烷培养液,研究六溴环十二烷溶液对玉米、菜心、白菜和萝卜种子发芽和根伸长的影响.结果表明,土壤过氧化氢酶活性随着六溴环十二烷浓度的增大呈现先促进后抑制的趋势,0.2%处理对其活性促进作用最大;而土壤磷酸酶的活性随着六溴环十二烷浓度的增大而增大.六溴环十二烷对菜心种子发芽表现出先抑制后促进的影响规律;玉米种子发芽率差异性不显著,萝卜种子发芽受六溴环十二烷的影响不大;对白菜种子发芽表现出明显的抑制作用.当处理浓度超过90 mg· L-1时,与对照处理相比,六溴环十二烷对4种种子的根伸长均表现出明显的促进作用.总之,白菜种子发芽和根伸长对HBCDs最敏感,受其抑制程度较高.虽然高浓度HBCDs促进菜心和萝卜种子发芽,但其根伸长受抑制.HBCDs对土壤磷酸酶活性呈现激活作用,对过氧化氢酶呈现抑制作用.

关键词: 六溴环十二烷 , 酶活性 , 种子发芽 , 根伸长 , 土壤生态质量

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