杨绍明
,
查文玲
,
孙清
,
李红
,
李瑞琴
,
尚培玲
应用化学
doi:10.3724/SP.J.1095.2014.30416
在玻碳电极(GCE)表面首先用增敏作用的多壁碳纳米管(MWCNTs)夹心于两层电沉积的铁氰化镍(NiHCF)氧化还原电化学探针之间,然后以金纳米粒子为固定核酸适配体的载体,构建了检测凝血酶的非标记型核酸适配体生物传感器.利用扫描电子显微镜(SEM)对MWCNTs和NiHCF的形貌进行了表征.利用电化学阻抗谱对传感器的组装过程进行了监测,用循环伏安法(CV)和差分脉冲伏安法(DPV)对传感器的电化学行为进行了研究.以铁氰化镍为探针的传感器对凝血酶的检测在1.0 ng/L~1.0 mg/L范围内呈良好的线性关系,相关系数为0.998,检测限为0.2 ng/L(S/N=3).
关键词:
铁氰化镍
,
核酸适配体
,
凝血酶
,
传感器
王雄飞
,
张玉杰
,
叶静
,
罗志强
,
詹雪艳
,
袁瑞娟
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2013.01024
对凝血酶-琼脂糖亲和色谱介质的制备方法进行了研究.首先使用凝血酶和溴化氰活化的琼脂糖制备凝血酶-琼脂糖亲和色谱介质,然后用生色底物法考察亲和色谱介质上凝血酶的活性,以凝血酶活性为指标对最佳偶联条件进行了优化.结果表明最佳条件为使用pH8.3的Na2CO,-NaHCO,溶液(含0.5 mol/L NaCl)为缓冲溶液,凝血酶用量为每1 g色谱介质加入凝血酶200 U,室温反应10 h.在最佳条件下所制备的色谱介质有较好的稳定性,在4℃条件下存放40天,亲和介质上的凝血酶活性仍有70.6%保留.该亲和色谱介质可广泛用于含凝血酶抑制剂的天然药物筛选和分离纯化.
关键词:
凝血酶
,
亲和色谱
,
生色底物法