曹勇
,
谷崇
,
刘利慧
,
李微雪
,
李敬远
,
雷良才
,
李海英
材料导报
doi:10.11896/j.issn.1005-023X.2015.06.009
在正丁基锂催化下,通过亲核取代反应将2,2'-联吡啶键连在氯球(PS-Cl,氯甲基化交联聚苯乙烯微球)表面,进而络合CuCl得到负载型催化剂PS-bpy/CuCl.将该负载型催化剂用于甲基丙烯酸甲酯(MMA)、丙烯酸甲酯(MA)或苯乙烯(Sty)等单体的原子转移自由基聚合反应(ATRP),并对聚合反应动力学规律进行了考察.实验结果表明,负载型催化剂PS-bpy/CuCl参与的聚合反应满足一级动力学反应规律,属活性/可控聚合,产物的分子量分布较窄(1.20),产物中铜的含量为0.094mg/g.负载型催化剂PS-bpy/CuCl可以通过简单过滤进行分离回收,活化后仍具有良好的活性,可重复应用.
关键词:
原子转移自由基聚合反应
,
负载型催化剂
,
亲核取代
,
甲基丙烯酸甲酯
宋子凤
,
张庆林
,
张养军
,
秦伟捷
,
钱小红
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2012.02006
利用原子转移自由基聚合法制备了鳞片状聚合物修饰的硅胶填料,将其作为一种新型的固定化酶载体,实现了蛋白酶的高密度固定,从而明显缩短了复杂蛋白质样品的酶解时间.使用标准蛋白质对固定化酶的酶解效率进行了考察,结果表明:鳞片状聚合物修饰的新型固定化酶硅胶填料具有较高的酶解效率,酶解标准蛋白质1 min 后,鉴定到肽段的氨基酸序列覆盖率可达95％以上.将该固定化酶硅胶填料成功应用于大肠杆菌全蛋白质的酶解,从2 min酶解肽段的混合物中鉴定到的蛋白质数量超过同样条件下溶液酶解12h的结果.另外,该固定化酶硅胶填料可以重复使用,其酶解效率具有良好的稳定性和重现性；该固定化酶具有较好的样品回收率,因而可以应用于蛋白质组学研究中.
关键词:
原子转移自由基聚合反应
,
鳞片状聚合物修饰硅胶
,
制备
,
胰蛋白酶固定
,
蛋白质组学
周廉淇
,
张姣
,
田芳
,
张养军
,
钱小红
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2012.10030
针对传统溶液酶解存在的酶解时间较长、酶自切物干扰以及蛋白酶不能重复使用等缺陷,通过电子转移生成催化剂的原子转移自由基聚合法修饰银丝,并以其为载体制备了一种新型的固定化酶反应器.用质谱考察了银丝固定化酶反应器(SW-Trypsin)的酶解效率、重复性和回收率.结果表明:绒毛状聚合物修饰的SW-Trypsin的酶解效率较高,酶解标准蛋白牛血清白蛋白(BSA)20 min后,肽段的氨基酸序列覆盖率可达93％,高于传统溶液酶解方法酶解16h所得79％的覆盖率.使用该固定化酶反应器于一个月内8次酶解BSA所得的氨基酸序列覆盖率在89％到97％之间,平均覆盖率为94％,显示出良好的稳定性.另外,该固定化酶反应器酶解马心肌红蛋白(MYO)的回收率为87.67％.最后,用SW-Trypsin酶解腾冲嗜热菌全蛋白20 min,所鉴定到的氨基酸序列覆盖率和蛋白数量与同样条件下溶液酶解16h的结果接近,且零漏切位点肽段的比例更高.加之容易分离的优点,SW-Trypsin在蛋白质组学的应用中具有良好的前景.
关键词:
原子转移自由基聚合反应
,
蛋白质组学
,
质谱
,
固定化酶反应器
,
银丝
范超
,
宋子凤
,
秦伟捷
,
蔡耘
,
钱小红
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2013.01007
采用原子转移自由基聚合法制备了亲水聚合物修饰的硅胶颗粒作为一种新型固定化酶载体,在实现胰蛋白酶高密度固定的同时,显著降低了载体材料非特异性吸附导致的样品损失.因此,该固定化酶材料兼具高酶解效率和高回收率的特性.以标准蛋白质牛血清白蛋白(BSA)为样本,使用该固定化酶1 mm即可完成酶解,鉴定到肽段对BSA的氨基酸序列覆盖率可达90％以上.该固定化酶材料成功应用于酵母菌全蛋白质复杂样本的酶解,从3 min酶解产物中鉴定到666个蛋白质,超过同样条件下溶液酶解12 h的鉴定结果.
关键词:
固定化酶
,
蛋白质组学
,
原子转移自由基聚合反应
