胡朝暾
,
肖震
,
周熙
,
陈佳
,
陈波
,
刘中华
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2015.01050
家福捕鸟蛛（ Selenocosmia jiafu）是一种生活在中国广西、云南等边远山区、中等个体、产毒量较大和毒性较强的蜘蛛新种。为了对家福捕鸟蛛粗毒成分进行初步探索，采用反相高效液相色谱、基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱和十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳方法对粗毒多肽和蛋白质的多样性进行了分析。结果表明：家福捕鸟蛛粗毒经色谱分离后得到40多个色谱峰，经质谱鉴定得到238个多肽，且多肽的相对分子质量呈现出双峰分布，其中62.5％的多肽的相对分子质量分布在3000~4500之间，33.2％的多肽的相对分子质量分布在1000~3000之间。这种相对分子质量的分布模式不同于其他已经报道的蜘蛛粗毒中多肽的分布模式。电泳分析结果表明：除了相对分子质量在10000以下的多肽分子，粗毒在50、72和90 kD附近有3条明显的条带，粗毒电泳条带经液相色谱-电喷雾四极杆飞行时间质谱鉴定，主要是一些血蓝蛋白、钾离子通道蛋白、钙蛋白酶等。说明家福捕鸟蛛粗毒中多肽和蛋白质种类丰富。
关键词:
反相高效液相色谱
,
基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱
,
十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳
,
多肽
,
蛋白质
,
蜘蛛粗毒
,
家福捕鸟蛛
陈曼
,
史键
,
王骊丽
,
耿信笃
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2006.05.015
建立了反相高效液相色谱分离、质谱定性、紫外检测定量测定康肾颗粒中葛根素含量的方法.采用YMC-ODS色谱柱(4.6 mm i.d.×100 mm,10 μm),选用甲醇(含0.1%三氟醋酸)和水(含0.1%三氟醋酸)体系为流动相,非线性梯度洗脱分离,流速1.0 mL/min,检测波长250 nm;用基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)分析鉴定对照品和样品的馏分,在确定目标峰后进行紫外检测定量测定.结果表明,葛根素在0.132 ～1.32 μg范围内其峰面积与进样量呈良好的线性关系(r=0.999 7),平均加标回收率高于103%,相对标准偏差低于2.0%(n=6).应用该方法测定康肾颗粒中葛根素,其平均含量为3.09 mg/g.该方法简单、快速、重现性好.
关键词:
反相高效液相色谱法
,
基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱
,
紫外检测
,
葛根素
,
康肾颗粒
