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固定化多酚氧化酶对水中苯酚和氯酚的去除?

王涵 , 李瑾 , 程华丽 , 马启敏

环境化学 doi:10.7524/j.issn.0254-6108.2015.03.2014072203

以壳聚糖/蒙脱土插层复合物为载体,吸附法制备固定化多酚氧化酶,并以此催化氧化去除水中的苯酚、4?氯苯酚和2,4?二氯苯酚.考察了固定化多酚氧化酶的制备条件,对酚类化合物的催化氧化条件、动力学特性以及固定化酶的重复使用性能.结果表明,固定化多酚氧化酶的最佳制备条件为pH 5.0,酶与载体质量比20 mg·g-1,固定化6 h,所得固定化酶的载酶量为12.12 mg·g-1,每克单位载体酶活为12.76×103 U·g-1.固定化多酚氧化酶对酚类化合物的最佳去除条件为:苯酚溶液pH 7.0,温度30℃;4?氯苯酚溶液pH 5.0,温度20℃;2,4?二氯苯酚溶液pH 5.0,温度30℃.在最佳反应条件下,酶与底物质量比为20 mg·mg-1时,固定化多酚氧化酶对苯酚、4?氯苯酚和2,4?二氯苯酚溶液去除率分别为63.6%、85.8%和87.8%.苯酚、4?氯苯酚和2,4?二氯苯酚的米氏常数Km值依次减小,最大反应速率Vmax依次增大,表明固定化酶对2,4?二氯苯酚的亲和力最强,催化速度最快.固定化酶循环使用6次(24 h)后对苯酚、4?氯苯酚和2,4?二氯苯酚的去除率分别为15.7%、24.2%和27.8%.

关键词: 多酚氧化酶 , 壳聚糖 , 蒙脱土 , 酚类化合物

CS-Cu酶膜的酶固定化工艺及其特性

葛振 , 蔡邦肖

膜科学与技术 doi:10.3969/j.issn.1007-8924.2012.01.012

以壳聚糖(CS)膜为载体,通过PPO与CS-Cu膜上的Cu2+鳌合,制备固定化PPO的CS-Cu酶膜.响应面法研究了酶膜在固定化过程中的Cu2+螯合量(QCu2+)、PPO浓度(CE)、pH三因素对固定化PPO的活力的影响,分别测定了溶液PPO和酶膜上固定化PPO的酶活性,并对CS-Cu-PPO膜的特性作了初步讨论.结果表明,PPO固定化的最优条件是:温度40℃,pH 7.67,QCu2+ 30.07mg/mL,CE2.12 mg/mL;酶膜中固定化PPO的米氏常数及其相对活力都比溶液PPO的大,半衰期约30 d,酶膜重复使用8次后的PPO活力降至79%.研究结果为开发特定功能的EMR提供了重要的基础.

关键词: 酶膜反应器 , 固定化酶 , 壳聚糖铜络合物 , 多酚氧化酶 , 响应面

多酚氧化酶在聚乙烯醇接枝谷氨酸树脂Cu(Ⅱ)配合物上的固定化

雷福厚 , 黄在银 , 石晓红

应用化学 doi:10.3969/j.issn.1000-0518.2001.11.008

研究了固定化酶载体——聚乙烯醇接枝谷氨酸树脂的合成及树脂络合金属铜离子后对多酚氧化酶的固定化.用红外光谱表征了树脂的结构,用DTA测定了树脂的热行为.考察了固定化酶的特性.结果表明,该树脂与Cu2+配位后的高分子配合物能较好地对多酚氧化酶固定化,此固定化酶最适pH值为5.59和6.64,能重复多次使用,经5次使用后其活力仍保留20%.固定化酶的热稳定性比游离酶高,而米氏常数基本相同.

关键词: 多酚氧化酶 , 聚乙烯醇接枝谷氨酸树脂 , 固定化 , 金属离子高分子配合物

盐酸胍变性烟草多酚氧化酶的复性

肖厚荣 , 徐小龙 , 解永树 , 刘清亮

应用化学 doi:10.3969/j.issn.1000-0518.2005.01.003

研究了盐酸胍变性烟草多酚氧化酶后的复性.结果表明,在没有外加添加剂存在的条件下,最优的复性条件为:盐酸胍浓度为1.5 mol/L;适宜的酶浓度为1.5×10-4 g/mL;变性时间短(30 min);复性温度低(4 ℃),此时,复性收率最高达到63.36%.1.0 mol/L硫酸铵具有一定的促进烟草多酚氧化酶复性的作用,与此相比,100 μmol/L硫酸铜促进烟草多酚氧化酶复性的效果较大,硫酸铜和硫酸铵存在协同作用,联合使用可获得最高的烟草多酚氧化酶复性收率;β-环糊精对变性烟草多酚氧化酶的复性具有一定辅助作用,溴化十六烷基三甲基铵(CTAB)可增强β-环糊精辅助变性蛋白质复性的作用.

关键词: 多酚氧化酶 , 复性 , 盐酸胍 , β-环糊精 , 溴化十六烷基三甲基铵

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