吴丹
,
王超展
,
耿信笃
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2007.02.014
蛋白折叠液相色谱法(PFLC)用于变性蛋白质复性并同时纯化时对流动相组成及其洗脱条件的要求远较通常的液相色谱法高.用端基为PEG-200的高效疏水作用色谱固定相对重组人干扰素-γ(rhIFN-γ)进行纯化并同时复性,详细研究了流动相组成、梯度洗脱模式和流速对rhIFN-γ质量回收率和活性的影响.分别以3.0 mol/L(NH4)2SO4+0.05 mol/L KH2PO4(pH 7.0)和0.05 moL/L KH2PO4(pH 7.0)为流动相A和B,采用35 min非线性梯度洗脱时,所得rhlFN-γ的质量回收率最高.
关键词:
高效疏水作用色谱法
,
流动相组成
,
梯度洗脱模式
,
纯化
,
复性
,
质量回收率
,
重组人干扰素-γ
金银哲
,
卢敬昊
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2006.05.009
有效地确定了反相高效液相色谱分离儿茶酚化合物的最佳条件.在水和甲醇的二元流动相里分别加入乙酸缓冲液,利用基于ln k=ln kw +SF, k=A+B/F, ln k=L+MF+NF2 (F是流动相中有机物甲醇的体积分数)等保留因子的一次或二次方程式的塔板理论得到色谱分离结果;利用保留原理得到等度和梯度洗脱的最佳条件.得出最佳初始流动相是含0.1%乙酸的水和含0.1%乙酸的甲醇(体积比为75∶25)的混合溶液;梯度洗脱条件:初始流动相保持15 min,然后用10 min的时间将上述二元流动相的体积比线性变换成50∶50,直到完成全部分离.通过实验证实该计算结果与实验值相近.
关键词:
反相高效液相色谱
,
儿茶酚化合物
,
HCI程序
,
保留原理
,
流动相组成
李瑞萍
,
袁琴
,
黄应平
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2014.04048
亲水作用色谱（ HILIC）是替代反相色谱（ RPLC）分离强极性及亲水性化合物的另一色谱模式，其分离机理与RPLC有很大不同，具有和 RPLC互补的选择性。在 HILIC模式中，采用正相色谱（ NPLC）中的极性固定相及含高浓度有机溶剂（通常为乙腈）的水溶液为流动相。硅胶是开发最早、研究最为深入及应用最为广泛的 HILIC 固定相，本文介绍了硅胶色谱柱的 HILIC保留机理，详细概述了操作条件如硅胶柱类型、流动相组成及柱温对 HILIC 分离的影响，并对硅胶填料色谱柱的 HILIC模式的发展方向与应用前景进行了展望。
关键词:
亲水作用色谱
,
保留机理
,
硅胶柱
,
流动相组成
,
柱温
韩小茜
,
温晓光
,
管永红
,
陈立仁
应用化学
doi:10.3969/j.issn.1000-0518.2004.02.008
在纤维素-三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)手性固定相上,拆分了农药三唑酮、戊菌唑、己唑醇及烯唑醇对映异构体,并考察了不同流动相组成及分离温度对三唑酮、己唑醇及烯唑醇手性拆分的影响,优化了色谱分离条件.实验结果表明,减少醇的浓度或增长醇的碳链长度或使用支链醇,样品的保留均会增加,但样品的立体选择性和手性拆分结果却因样品结构的不同而呈现不同的变化.分离温度在15～40℃内,仅三唑酮对映体的ln α与1/T关系呈线性关系,其手性拆分过程受焓控制;己唑醇及烯唑醇对映体的ln α与1/T关系呈非线性关系,分离温度在15～25℃内,手性拆分过程受焓控制,分离温度在25～40℃内,手性拆分过程受熵控制.
关键词:
纤维素-三(二甲基苯基氨基甲酸酯)
,
手性固定相
,
手性拆分
,
三唑类农药
,
流动相组成
,
HPLC
