肖乐东
,
唐爱国
,
莫喜明
,
罗昔波
,
皮兰敢
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2009.02.018
建立了在线衍生、双波长高效液相色谱-荧光检测器同时检测血清中犬尿氨酸(kynurenine, Kyn)和犬尿喹啉酸(kynurenic acid, KYNA)含量的方法.血清标本经5%高氯酸溶液去除蛋白质后,上清液直接进样分析测定.采用的色谱柱为Hypersil C8柱;流动相为0.25 mol/L 醋酸锌-50 mmol/L 醋酸溶液(含3%乙腈),流速为1.5 mL/min.在0～10 min时间段,在激发波长和发射波长分别为365 nm和480 nm时检测Kyn;10 min后,在激发波长和发射波长分别变换为344 nm和404 nm时检测KYNA.Kyn的保留时间约为8.1 min,线性范围为98～19600 nmol/L,最低检出浓度为50 nmol/L,平均回收率为94.88% ,日内、日间测定值的相对标准偏差(RSD)均低于4% .KYNA的保留时间约为13.0 min,线性范围为2.62～1047 nmol/L,最低检出浓度为0.11 nmol/L,平均回收率为102.72% ,日内、日间测定的RSD均低于4% .苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸和 5-羟色胺等物质对目标物的检测无干扰.71例健康成人血清中,Kyn和KYNA含量分别为(1.40±0.34) μmol/L 和(24.22±8.67) nmol/L.该方法简便、快速、灵敏、特异,适于临床和科研应用.
关键词:
高效液相色谱法
,
荧光检测
,
犬尿氨酸
,
犬尿喹啉酸
,
色氨酸
,
在线衍生
,
血清
王瑞
,
唐爱国
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2006.02.007
建立了一种能同时检测血清中的犬尿氨酸(kynurenine,Kyn)和色氨酸(tryptophan,Trp)的高效液相色谱-紫外检测法.采用的色谱柱为Symmetry Shield RP-C18柱(150 mm×3.9 mm i.d.,5 μm),流动相为15 mmol/L乙酸钠-乙酸溶液(含2.7%乙腈,pH 3.6),流速为1.0 mL/min,紫外检测波长为225 nm.血清标本经5.0% (体积分数)高氯酸溶液去除蛋白质后取上清液直接进样分析测定.研究结果表明,Kyn保留时间为3.5 min,线性范围为0.098～49 μmol/L,最低检出浓度为0.02 μmol/L,回收率为90.82% ～93.45% ;Trp保留时间为8.1 min,线性范围为4.9～490 μmol/L,最低检出浓度为0.20 μmol/L,回收率为95.51% ～98.67% .Kyn和Trp日内、日间测定的相对标准偏差均小于4% ,苯丙氨酸、酪氨酸、5-羟色胺和犬尿喹啉酸等物质对该法均无干扰.该方法简便、快速、稳定、可行,可应用于临床和科研工作.
关键词:
高效液相色谱法
,
紫外检测
,
色氨酸
,
犬尿氨酸
,
血清
罗昔波
,
唐爱国
,
皮兰敢
,
肖乐东
,
敖翔
,
卜艳红
,
王瑞
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2008.01.012
建立了高效液相色谱-荧光检测(HPLC-FLD)测定血清中犬尿氨酸(kynurenine,Kyn)含量的方法.采用Hypersil C8色谱柱(300 mm×6.0 mm,10 μm),流动相为0.25 mol/L醋酸锌及50 mmol/L醋酸溶液(含3%乙腈),流速为1.5 mL/min,荧光检测激发波长和发射波长分别为365 nm和480 nm.血清标本经5%(v/v)高氯酸溶液去除蛋白质后取上层清液直接进样,Kyn经流动相等度洗脱分离后,用FLD进行测定.研究结果表明Kyn保留时间约为8.3 min,线性范围为0.098～19.6 μmol/L,最低检出浓度为0.04 μmol/L,回收率为90.8%～96.2%,日内、日间测定的相对标准偏差均小于5%,苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸、5-羟色胺和犬尿喹啉酸等物质对犬尿氨酸的测定均无干扰.建立的方法简便、快速、灵敏、特异,适用于临床和科研应用.
关键词:
高效液相色谱法
,
荧光检测
,
犬尿氨酸
,
人血清
甄乾娜
,
黄小兰
,
张晓清
,
班艳娜
,
丁敏
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2011.00435
建立了一种高效液相色谱-程序波长紫外检测法同时测定血浆中色氨酸(Trp)及其主要代谢产物犬尿氨酸(Kyn)和5-羟色胺(5-HT).以茶碱为内标(IS),采用BDS-Hypersil-C8柱(150 mm×4.6 mm,5 μm)分离.流动相为10 mmol/L醋酸钠缓冲液(pH 4.5)-乙腈(94:6,v/v),流速为0.6 mL/min;柱温为25℃;紫外检测波长设定:Kyn和IS为360 nm,5-HT为220 nm,Trp为302 nm.3种物质的平均回收率为87%～113%;线性范围分别为3.97～400 μmol/L(Trp),0.421～20.2 μmol/L(Kyn),4.36～980 nmol/L(5-HT);检出限分别为0.134 μmol/L(Trp),0.0160 μmol/L(Kyn),2.03 nmol/L(5-HT).利用该方法对15例抑郁症患者和15例健康志愿者的血浆进行测定,结果表明两组间Trp的代谢存在显著的差异.
关键词:
高效液相色谱法
,
色氨酸
,
犬尿氨酸
,
5-羟色胺
,
血浆
冯成亚
,
高洁莹
,
甄乾娜
,
樊子勉
,
朱明松
,
杨香春
,
丁敏
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2013.01054
建立了醋酸锌在线衍生高效液相色谱法同时测定血浆中色氨酸(Trp)、犬尿氨酸(Kyn)、5-羟吲哚乙酸(5-H iaa)和犬尿喹啉酸(Kyna)的方法.以3-硝基酪氨酸为内标(IS),采用Hypersil C-18柱(250 mm×4.0 mm,5μm),以250 mmol/L醋酸锌溶液(pH 5.5)-乙腈(95∶5,v/v)为流动相,流速为0.8 mL/min,柱温30℃.荧光检测波长设定:5-Hiaa为278 nm(λex)/343 nm(λem),Kyna为244 nm(λex)/400 nm(λem);紫外检测波长设定:Kyn和IS为360 nm,Trp为302 nm.4种物质的回收率在91.62％～114.17％之间;线性范围分别为2.50 ～ 320.00μmol/L(Trp),0.32～15.36 μmol/L(Kyn),3.27 ～ 104.60 nmol/L(5-Hiaa),14.00 ～ 464.80 nmol/L(Kyna);检出限分别为0.078 μmol/L(Trp),0.056 μmol/L(Kyn),0.690 nmol/L(5-Hiaa),1.290 nmol/L(Kyna).利用该方法对30例正常孕妇和28例女性健康志愿者的血浆进行测定,结果表明两组间Trp,Kyn和Kyna含量有显著性差异.该方法操作简便,重复性好,灵敏度高,适合于临床检测.
关键词:
高效液相色谱法
,
色氨酸
,
犬尿氨酸
,
5-羟吲哚乙酸
,
犬尿喹啉酸
,
血浆
