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碳酸酐酶在无活性官能团聚合物表面的偶联接枝新方法

王琴梅 , 张涤华 , 张静夏

应用化学 doi:10.3969/j.issn.1000-0518.2009.06.004

采用异双官能团光偶联剂-(全氟代叠氮基苯甲酰胺基)乙基-1,3-二硫代丙酸磺基丁二酸亚胺酯(SFAD),将碳酸酐酶(CA)接枝在无活性官能团的聚甲基戊烯(PMP)膜式氧合器表面,以对硝基苯酚乙酸酯(p-NPA)为底物,采用紫外分光光度计测定了接枝CA的活性、浓度、重复利用性、储存稳定性. 结果表明,采用SFAD能将酶成功地接枝在无活性官能团的聚合物表面;共价接枝的CACI(Covalently immobilized CA)具有催化活性,其在PMP表面的接枝量随SFAD浓度的增加而增加,最高达到0.414 U/m2,为单分子层理论接枝量的87.4%. CACI比物理吸附的CAPA(Physically adsorbed CA)具有更好的重复利用性. 1次洗涤后,PMP表面CAPA活性为0,而9次洗涤后CACI仍保留约59%的活性. 37 ℃下CACI比CA溶液表现出更好的储存稳定性:16 d内,CA溶液失去约90%的活性,而CACI只失去约60%的活性.

关键词: 聚甲基戊烯 , 光偶联剂 , 碳酸酐酶 , 对硝基苯酚乙酸酯

碳酸酐酶在硅藻土上的固定化及其性质研究

高伟芳 , 肖翔 , 张朝晖

材料导报

以硅藻土为载体,通过共价结合法固定化碳酸酐酶.对制备固定化晦过程中的pH值、加酶量、反应温度、反应时间几个重要的影响因素进行了研究和优化,并对固定化酶和游离酶的酶学性质进行了比较.结果表明,固定化酶的最适反应温度为30℃,比游离酶高了5℃;最适反应pH值为6.0,比游离酶低了2个pH值单位.该固定化酶的热稳定性、酸碱稳定性和操作稳定性均高于游离酶.

关键词: 碳酸酐酶 , 固定化 , 硅藻土

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