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用MicroBCA方法定量检测硅烷化表面固定的纤维连接蛋白

周超 , 张慧婷 , 陈俊英 , 李遂焰 , 黄楠

功能材料

使用microBCA方法(micro-bicinchoninicacid protein assay),定量研究了人纤维连接蛋白(fi-bronectin,Fn)在硅烷化石英玻璃表面实现共价固定的情况。首先对石英玻璃进行化学清洗,使表面的羟基得以充分暴露。再利用硅烷偶联剂(APTE)将氨基基团引入,并通过EDC/NHS催化体系把人纤维连接蛋白以酰胺键的形式共价固定于该表面。最后用Mi-croBCA方法对该表面固定化的生物分子(Fn)进行量化表征。应用水接触角、X射线光电子能谱(X-rayphotoelectron spectroscopy,XPS)、原子力显微镜(atomic force microscope,AFM)等方法对各步处理效果进行跟踪分析。结果表明Fn在硅烷化石英玻璃表面实现了固定,一定范围内,硅烷化表面的Fn固定量随所使用Fn孵化液浓度的增加而增大。为生物材料表面改性与修饰研究中生物大分子的量化表征提供了一种新方法。

关键词: MicroBCA , 石英玻璃 , 纤维连接蛋白 , 定量检测

钛表面固定纤维连接蛋白及其体外细胞培养

饶桦强 , 冯波 , 鲁雄 , 汪建新 , 江旭 , 翁杰

复合材料学报

通过低温等离子聚合的方法,以丙烯酸为单体在钛表面沉积含有羧基的薄膜,以羧基为接入点固定纤维连接蛋白.样品表面用X射线光电子能谱、傅里叶红外光谱仪进行表征.将固定了纤维连接蛋白的样品进行体外细胞培养,所用的细胞为MG63骨瘤细胞,对照样为纯钛.结果表明,钛表面聚丙烯酸薄膜能有效地固定纤维连接蛋白,并且固定纤维连接蛋白的样品能促进骨瘤细胞的生长和黏附,具有更高的成骨活性.

关键词: , 丙烯酸 , 纤维连接蛋白 , 低温等离子聚合 , 细胞培养

BSA和FN在纳米化钛表面的蛋白吸附及释放行为

史婕 , 冯波 , 鲁雄 , 汪建新 , 段可 , 翁杰

无机材料学报 doi:10.3724/SP.J.1077.2011.01299

通过阳极氧化技术,在钛表面制备一层管径为100nm左右的氧化钛纳米管.选取小牛血清白蛋白(BSA)和纤维连接蛋白(FN)两种蛋白质进行蛋白吸附实验,并在仿生条件下进行蛋白质的体外释放.对吸附了蛋白的纳米管试样表面进行红外和荧光定性分析,同时采用考马斯亮蓝法对纳米管表面的蛋白吸附进行定量检测,实验发现纳米管试样更有利于蛋白质的吸附,且FN在试样表面吸附时的吸附率大于BSA.氧化钛纳米管的蛋白释放分为突释和缓释两个阶段,其释放机制符合Fickian扩散.

关键词: 氧化钛纳米管 , 蛋白质吸附及释放 , 小牛血清白蛋白 , 纤维连接蛋白

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