田嘉嘉
,
陈爽
,
李东辉
应用化学
doi:10.3969/j.issn.1000-0518.2006.12.002
建立了一种基于荧光各向异性原理均相测定蛋白酶及其抑制剂的方法. 具有如下特点:灵敏度高(可测到纳克级的蛋白酶);是一种均相检测方法,可对酶反应体系进行实时跟踪检测;作用底物是蛋白酶的天然底物-蛋白质;适用的pH值范围宽(pH 2.0～10.0),可用于酸性、中性和碱性介质中蛋白酶的测定;所用荧光标记物TMRITC的发射波长(581 nm)大于荧光素类(520 nm),有利于减少散射光的干扰,提高了荧光各向异性测量的稳定性. 还可应用于蛋白酶抑制剂的检测.
关键词:
荧光各向异性
,
罗丹明
,
蛋白酶
,
胰蛋白酶
,
胃蛋白酶
,
菠萝蛋白酶
,
蛋白酶抑制剂
王放
,
李健生
,
冉冬琴
,
段梦姗
,
孙秀云
,
王连军
无机材料学报
doi:10.3724/SP.J.1077.2012.00185
在不外加无机酸的条件下,通过水热合成法制备了短孔道六方板状有序介孔材料Zr-Ce-SBA- 15 (ZCS).以ZCS和传统SBA- 15为载体对胃蛋白酶进行固定,并利用N-(2-氨乙基)-3-氨丙基三甲氧基硅烷(AAPTS)对酶固定化材料进行功能化,以缩小开口孔径从而减少酶泄漏.采用小角X射线衍射、扫描电镜、透射电镜、氮气吸附和红外光谱对样品进行结构表征.结果表明,胃蛋白酶成功固定到介孔孔道中,AAPTS嫁接到材料中且没有破坏介孔结构.固定化实验表明相比于SBA-15,ZCS对胃蛋白酶具有较快的吸附速度和较强的固定化能力(最大负载量为257.9 mg/g),短孔道材料能有效地促进分子的扩散传递.催化活性测定以牛血红蛋白为探针物,与游离酶相比,固定酶对牛血红蛋白保持着稳定的活性.
关键词:
短孔道
,
介孔材料
,
胃蛋白酶
,
酶固定化
,
催化
迟燕华
,
庄稼
,
易显华
,
董发勤
,
李克安
,
李娜
,
童沈阳
应用化学
doi:10.3969/j.issn.1000-0518.2000.01.007
采用UV光谱法研究了在pH 2.15的酸性溶液中,邻{2-[α-(2-羟基-5-磺基苯偶氮)-亚苄基]肼基}苯甲酸(ZCN)与胃蛋白酶(Pepsin)相互作用的反应机理及基本条件,认为它们之间主要靠分子间的静电引力结合. 研究了酸度、温度、时间、离子强度、不同类型蛋白质等对该反应体系的影响. 测得ZCN与Pepsin复合物的表观摩尔吸光系数ε=3.16 ×105 L/mol.cm,两者的最大结合数为100. 探讨了适应该反应的结合模式,由实验数据整理后认为基本符合Scatchard模型.
关键词:
邻羟基磺基苯偶氮亚苄基肼基苯甲酸
,
胃蛋白酶
,
作用机理
,
UV光谱法
