齐崴
,
何明霞
,
何志敏
,
史德青
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2002.01.001
将高效凝胶排阻色谱(HPSEC)技术与水解度(DH)概念相结合,对酪蛋白-胰蛋白酶水解体系的酶解反应过程进行色谱分析,得到定量表征复杂酶解反应进程和不同DH值时多样性酶解产物相对分子质量分布的二维图线;依据蛋白质结构信息,结合HPSEC实验谱图,对胰蛋白酶作用于酪蛋白时的酶解断裂位点进行剖析,初步推断反应历程,并得到理论酶解肽段的相对分子质量分布图及酶解物中活性多肽酪蛋白磷酸肽(CPPs)肽谱.
关键词:
酪蛋白
,
胰蛋白酶
,
酶促水解
,
水解度
,
高效凝胶排阻色谱
,
酪蛋白磷酸肽
,
肽谱
田嘉嘉
,
陈爽
,
李东辉
应用化学
doi:10.3969/j.issn.1000-0518.2006.12.002
建立了一种基于荧光各向异性原理均相测定蛋白酶及其抑制剂的方法. 具有如下特点:灵敏度高(可测到纳克级的蛋白酶);是一种均相检测方法,可对酶反应体系进行实时跟踪检测;作用底物是蛋白酶的天然底物-蛋白质;适用的pH值范围宽(pH 2.0～10.0),可用于酸性、中性和碱性介质中蛋白酶的测定;所用荧光标记物TMRITC的发射波长(581 nm)大于荧光素类(520 nm),有利于减少散射光的干扰,提高了荧光各向异性测量的稳定性. 还可应用于蛋白酶抑制剂的检测.
关键词:
荧光各向异性
,
罗丹明
,
蛋白酶
,
胰蛋白酶
,
胃蛋白酶
,
菠萝蛋白酶
,
蛋白酶抑制剂
刘峥
,
林原斌
,
吕慧丹
材料导报
制备了交联海藻酸钠磁性微球,并以磁性微球为载体,戊二醛为交联剂,将胰蛋白酶固定化;利用透射电镜、粒度分析、红外分析对交联海藻酸钠磁性微球进行了表征;探讨给酶量、戊二醛浓度和pH值对固定化酶活性的影响;与自由酶比较,考察了固定酶的酶学性质.结果表明:交联海藻酸钠磁性微球是固定化胰蛋白酶的良好载体,固定化酶最适宜的条件是吸附时间12h,给酶量为100mg/0.1g磁性载体、交联剂戊二醛浓度为5%、溶液pH值为6,同时将酶固定化后,酶的稳定性和催化性能均有所提高.
关键词:
交联海藻酸钠
,
磁性微球
,
胰蛋白酶
,
固定化
崔园园
,
陈红
,
周丰
,
冯超阳
,
邓阳全
,
张志赋
,
陆群
,
周先礼
复合材料学报
通过离子凝胶法制备出球形完好的海藻酸钠-胰蛋白酶微球.红外分析表明,微球中凝胶基质通过海藻酸钠的-COO-与Ca2+发生静电作用交联形成.SEM观察显示微球中存在蛋格结构及孔洞.考察了不同因素对微球载药率、包封率和体外释药率的影响.结果表明,海藻酸钠水溶液浓度越高释药率越低,当海藻酸钠与胰蛋白酶质量比为4,海藻酸钠水溶液浓度为4%时呈最大的包封率和载药量;随着海藻酸钠与胰蛋白酶质量比增大,载药率降低,包封率呈先增后降变化趋势.
关键词:
海藻酸钠
,
胰蛋白酶
,
微球
,
载药率
,
释药率
肖鹏
,
李大雷
,
满燕
,
耿利娜
,
吕雪飞
,
邓玉林
色谱
doi:10.3724/SP.J.1123.2012.07019
将核酸适配体作为胰蛋白酶固定化介质,制备了一种新型的微流控芯片酶反应器,并与高效液相色谱-串联质谱联用,搭建了在线分析平台；分别使用标准蛋白及混合蛋白样品对芯片的酶解效率及联用平台的分析能力进行了初步评价.结果表明,5 ng肌红蛋白经该平台分析后肽段覆盖率可达到37％；对500 ng混合蛋白进行3次平行分析,肽段覆盖率及相对标准偏差分别为44.3％、6.5％(牛血清白蛋白),65.0％、2.7％(肌红蛋白)和62.0％、5.6％(细胞色素c)；初步实验表明,该在线分析平台具有检测灵敏度高、重现性好、酶解效率高的特点,有望在蛋白质组学分析中发挥重要作用.
关键词:
高效液相色谱-串联质谱
,
胰蛋白酶
,
蛋白质
,
核酸适配体
,
芯片酶反应器
宋太发
,
李子博
,
杨芳慧
,
周江
,
李林梅
材料开发与应用
常温下,以胰蛋白酶(trypsin)为模板,以抗坏血酸(AA)为还原剂一步合成了花状纳米金.通过考察AA的浓度和pH值等对金纳米粒子形成的影响,初步探讨花状纳米金的生长机理.结果表明,在pH值为5.0的水溶液中,固定HAuCl4与trypsin的体积比为5∶1,加入抗坏血酸,并使AA终浓度为3.0 mM,可制备性状稳定、尺寸为80～120 nm的花状纳米金.
关键词:
花状纳米金
,
胰蛋白酶
,
生长机理
