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高通量微流控荧光定量PCR激发光非均匀性研究

王华东 , 赵树弥 , 朱灵 , 李志刚 , 王安 , 刘勇

连铸 doi:10.3969/j.issn.1007-5461.2015.05.016

研究高通量微流控荧光定量聚合酶链反应(PCR)激发光非均匀性问题对提高DNA浓度定量结果的精度具有重要意义.根据荧光定量PCR的原理,分析了激发光非均匀性对循环阈值(Ct)测量精度的影响,给出了激发光非均匀性引起Ct值测量偏差的表达式,确定了激发光强度标准偏差应小于11.56%的要求.根据微流控芯片结构特点及激发光均匀性要求,设计了基于光棒的匀光光路用于解决激发光照度非均匀性问题.模拟及实验所得到的激发光照度的相对标准偏差分别为3.10%、6.01%,二者均小于11.56%.所设计匀光光路能够满足高通量微流控荧光定量PCR的要求.

关键词: 医用光学与生物技术 , 均匀照明 , 光学设计 , 微流控芯片 , 荧光定量PCR

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