李翔
,
张养军
,
耿信笃
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2002.02.009
通过比较具有相同柱几何体积的半制备色谱柱和色谱饼的性能,发现在同样的色谱条件下,用液相色谱方法分离生物大分子时,在分离效率和蛋白活性回收方面,色谱饼和色谱柱的差异不大;由于色谱饼中的填料较色谱柱中的装填更为紧密和均匀,当流动相流速增加时,色谱饼不仅反向压力上升慢,而且质量和体积负载也比色谱柱高.该结果表明使用色谱饼的色谱分离不仅具有可与高效液相色谱(HPLC)媲美的分离效率,而且还具有中、低压色谱分离的高柱负载,这有利于蛋白保持高的生物活性,为色谱饼的工业化应用奠定了基础.
关键词:
液相色谱
,
半制备色谱柱
,
半制备色谱饼
,
蛋白复性
李敏
,
王彦
,
龚波林
,
耿信笃
色谱
doi:10.3321/j.issn:1000-8713.2003.03.006
以溶菌酶(Lys)为目标蛋白,用计量置换保留理论(SDT-R)中的参数Z和logI对弱阳离子交换色谱(WCX)中"准天然态"和脲变还原与非还原的两种变性状态的Lys的分子构象变化进行了表征.发现在流动相中含有脲时,蛋白的保留仍服从SDT理论,可以准确测定在特定脲浓度条件下Lys的Z及logI值.结果表明,3种分子构象状态的Lys的Z值均随脲浓度改变呈现不连续变化;"准天然态"Lys在同一脲浓度条件下的Z值比变性状态的大,logI比变性状态的小,而非还原变性态和"准天然态"Lys的Z和logI值比较接近.还对不同脲浓度条件下Lys的活性回收率与Z值之间的关系进行了研究.
关键词:
弱阳离子交换色谱
,
溶菌酶
,
分子构象
,
蛋白复性
,
表征
